МЕДЛЕННОПРОНИКАЮЩИЕ КРАСИТЕЛИ В ОЦЕНКЕ СОСТОЯНИЯ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ И РАСТЕНИЙ

Мельникова Е. В., Рощина В. В., Гордон Р. Я., Яшин В. А., Карнаухов В. Н.
Институт биофизики клетки РАН, 142292 Пущино
Ряд флуоресцентных красителей являются медленнопроникающими для половых клеток животных и растений (Мельникова, 1991, 1994; Мельникова, Бочарова, 1991; Рощина и др., 1998). Это свойство флуорохромов является зависимым от стадии развития. Эмбрионы млекопитающих (КРС, кролики, бараны, мыши) на ранних стадиях развития (от зиготы до морулы) являются устойчивыми к окраске этидиум бромидом (ЭБ) и АНС. На более поздних стадиях развития - морулы, а особенно бластоцисты - увеличивается число зародышей, окрашиваемых ЭБ. Пыльца гиппеаструма Hippeastrum hydridum (Amaryllidaceae) - клетки мужского гаметофита - также теряла устойчивость к окрашиванию этидиум бромидом (ЭБ), когда снижалась скорость ее прорастания in vitro, например, в процессе старения, при g- и УФ-облучении, а также при воздействии отдельных как эндогенных, так и экзогенных метаболитов (гайллардин и аустрицин). Флуорохромирование спермиев травяной лягушки Rana акридиновым оранжевым (АО) для оценки их целостности по степени окрашиваемости показало, что этот флуорохром тоже может быть медленнопроникающим для этих клеток. Оценка скорости окрашивания АО суспензии спермиев позволила оценить присутствие в ней клеток выстилки семенника и ввести для очистки повторную фильтрацию. Спермии были устойчивы также и к флуорохромированию ЭБ. Устойчивость половых клеток к флуорохромированию медленнопроникающими флуорохромами коррелировала с их жизнеспособностью во всех приведенных примерах и предлагается как метод ее оценки для данных клеток. Делается вывод об устойчивости половых клеток к флуорохромированию медленнопроникающими красителями, являющейся признаком присущим как растительному, так и животному миру. Работа поддержана РФФИ (грант № 96-04-480).