ИССЛЕДОВАНИЯ ПОДВИЖНОСТИ РЕСНИЧЕК РЕСПИРАТОРНОГО ЭПИТЕЛИЯ ЧЕЛОВЕКА В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ
Шабалин В. В.
Санкт-Петербургский государственный научный центр пульмонологии МЗ РФ
Мукоцилиарный транспорт,
главную роль в котором играют координированные действия реснитчатых
клеток респираторного эпителия человека, расположенных практически
по всем участкам дыхательных путей, является одной из составляющих
процесса мукоцилиарного клиренса. В исследованиях, связанных с
диагностикой и анализом патологических нарушений при заболеваниях
верхних и нижних отделов дыхательных путей человека, используется
методика телевизионной микроскопии и специальная математическая
обработка полученных результатов. Методика основана на совмещении
методов современной микроскопии с новейшими средствами телевизионного
и видеоконтроля за объектами (реснитчатыми клетками), исследуемыми
в биологии и медицине, с последующей записью интересующей информации
и ее обработкой на компьютере. Важной особенностью данной методики
является то, что исследуемый объект изучается в среде, близкой
к той, в которой он изначально функционировал, с сохранением по
возможности всех его параметров работы. Препарат не подвергался
окрашиванию органическими красителями и находился в физиологическом
растворе или среде-199 (на основе р-ра Хенкса). Это позволяло
изучать биологические объекты практически не нарушая их морфофункционального
состояния, исследовать поведение объектов или группы таких объектов
в динамике и наблюдать, как изменяется состояние и характер работы
такого объекта под воздействием различных стимулирующих факторов,
а также в динамике, и фиксировать все эти процессы на компьютере
в виде видеозаписей. Разработана математическая программа количественной
оценки характера двигательной активности ресничек. Она позволяет
рассчитать не только частоты, но и амплитуды биений ресничек в
результате их двигательной активности; длительность фаз удара
и замаха, их соотношение; рассчитать, исходя из характеристик
колебаний ресничек, скорости потока слизи над ресничками на основе
разработанной математической модели. Кроме того, из эксперимента
определялись морфометрические характеристики ресничек (их средняя
длина и среднее число на единицу площади), что использовалось
в модельных расчетах. Таким образом, во-первых, по видеозаписям
колебаний ресничек, определялись частоты колебаний в фазе удара
и замаха, а также средняя амплитуда отклонения ресничек от вертикального
направления; во-вторых, на математической модели оценивалась работа
мукоцилиарного транспорта и моделировалось соотношение слоев гель/золь.
Принцип работы программы обработки основан на методах спектрального
анализе Фурье временных сигналов различной природы. Это позволило
количественно рассчитать частоту колебаний каждой точки (или достаточно
малого объекта, специально выделенного с помощью фильтрации каждого
видеокадра). Данная методика может использоваться в диагностике
многих заболеваний дыхательных путей, основываясь на различии
в двигательной активности цилиарного аппарата реснитчатого эпителия
в норме и при патологии.