МЕТОД ДВУХФАЗНЫХ ВОДНО-ЛИПИДНЫХ ХЕМИЛЮМИНЕСЦИРУЮЩИХ СИСТЕМ

Журавлев А. И.
Московская Государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии, кафедра биофизики, 109472 Москва
Метод выявляет квантовые явления - электронные возбуждения и спонтанную хемилюминесценцию при взаимодействии белков и липидов на границе несмешивающихся водно-белковой и липидной фаз без каких -либо внешних физических или химических воздействий. Субстраты. Нижняя - тяжелая водная фаза толщиной до 2 см., представляет собой водный раствор исследуемого белка, аминокислоты или сыворотки крови.

Верхняя фаза - тонкий слой легко автоокисляющегося липида: олеиновая кислота, линоленовая кислота, олеат, линолеат, ненасыщенные северные нерафинированные подсолнечное и льняное масла. Измерение спонтанной биохемилюминесценции в видимой области спектра проводят по методу Б.Н.Тарусова (Биофизика, 1961, №4, с.490-492; Биофизика, 1991, №3, с.489-496) на установке для сверхслабых световых потоков с чувствительностью до n.101 квант/сек.см2. Время измерения выбирают экспериментально для выявления динамики процесса в пределах от 10 минут до 3-х суток. Раствор белка практически спонтанно не хемилюминесцирует. Ненасыщенные липиды на воздухе автоокисляются и спонтанно светят с интенсивностью n.102 квант/сек.см2. В двухслойной системе без каких-либо внешних воздействий спонтанная биохемилюминесценция усиливается от уровня свечения липида в 10-100 раз, т.е. до n.103 - n.104квант/сек.см3, переходя из сверхслабого в слабое свечение. Излучает в основном граница раздела фаз, на которой образуется белково-липидная прозрачная полимерная пленка. Интенсивность свечения зависит от состава аминокислот и свойств сыворотки при растворении белков. Метод дает возможность прямого измерения электронных возбужденных состояний (ЭВС) в липид-белковых комплексах и устойчивости системы к свободнорадикальному автоокислению.