Методом patch clamp исследовались ВП-клетки из вкусовых почек языка крыс и мышей. Было установлено, что ВП-клетки могут отвечать на замену экстраклеточного Na⁺ на непроницаемый Н-метил-д-глюкамин (NMG⁺) обратимым увеличением как минимум на порядок ионной проницаемости наружной мембраны. Это явление требовало присутствия в наружном растворе ионов Mg²⁺, но не Са²⁺. В ряде случаев Na⁺/NMG⁺-замена приводила к осцилляциям проводимости ВП-клеток, которые подавлялись удалением экстраклеточного Mg²⁺. Описываемые явления и их кинетика.могут быть объяснены, если ВП-клетки экспрессируют Na⁺/Mg²⁺-oбмeнник, Mg²⁺-проницаемую проводимость и проводимость, активируемую внутриклеточным Mg²⁺ ([Mg]_in). В этом случае замена наружного Na⁺ на NMG⁺ ведет к ингибированию Na⁺/Mg²⁺-oбмeнникa, что вызывает увеличение [Mg]_in и активацию [Mg]_in-завиcимой проводимости. В качестве одного из тестов данной гипотезы мы исследовали динамику [Mg]_in в цитоплазме ВП-клеток, используя изолированные ВП, флуоресцентный индикатор Mag-Fura-2 и визуализацию относительной флуоресценции (ratio imaging). ВП адгезировались на покровном стекле и 26-30 мин прокрашивались в среде, содержащей мембранно-проницаемый индикатор Mag-Fura-2/AM, который затем отмывался раствором без Mg²⁺. Флуоресценция от ВП регистрировалась CCD камерой (эмиссия - 490 нм и выше, возбуждение - 340 и 380 нм) и использовалась для создания цифрового изображения клеток в данной ВП, из которых 12-15 клеток выбиралось для анализа. В норме (140 мМ NaCl,l мМ MgCl₂, 1 мМ СаС1₂ в наружном растворе) средняя концентрация [Mg]_in была оценена нами примерно в 300 мкМ. Замена экстраклеточного NaCI на NMGC1 вызывала выраженный рост [Mg]_in вплоть до 4-10 мМ (обычно до 1-3 мM) в течение 5-15 мин и в большинстве (~90%) клеток ВП. Примерно в 20% случаев [Mg]_in претерпевал 3-4 осцилляции, прежде чем достичь максимального уровня. NMG-индуцированный рост [Mg]_in зависел от внеклеточной концентрации как Са²⁺, так и Mg²⁺ и наблюдался даже в отсутствие последнего, свидетельствуя о сложном механизме регуляции [Mg]_in. Приведенные факты не могут быть объяснены входом наружного Mg²⁺ и ингибированием Na⁺/Mg²⁺-oбмeнa и, очевидно, требуют предположить, что высвобождение Mg²⁺ из внутриклеточного буфера вносило вклад в эффекты NMG⁺. Сладкий сахарин и горький денатониум также вызывали рост [Mg]_in, однако в меньшей степени, чем NMG и всего в 2-5 клетках на ВП. Полученные данные свидетельствуют о том, что в ВП-клетках функционируют эффективные системы, контролирующие [Mg]_in, a также [Mg]_in-зависимая проводимость, которые могут быть вовлечены во вкусовую трансдукцию. Данная работа была частично поддержана Медицинским институтом им. Ховарда Хьюза (США) (грант HHMI 75195-545801), Фондом гражданских исследований и развития (США) (грант RN1-401), а также фондом Deutsche Forschungsgemeinschaft (гранты SFB 246-C1 и Lil26 / 7-1).