АНАЛИЗ САМОСБОРКИ МОЛЕКУЛ КОЛЛАГЕНА ТИПА I В ФИБРИЛЛЫ

Николаева Т. И., Писаченко А. И., Рочев Ю. А., Гаврилюк Б. К.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино Московской обл.
Показано, что самосборка молекул коллагена типа I в фибриллы зависит от ряда факторов: температуры, концентрации коллагена и наличия телопептидов. Переход молекул коллагена из уксуснокислого раствора в нейтральный буферный раствор (0,02 М Na2HPO4, 0,15 M NaCl, pH 7,2) и термостатирование образцов коллагена в течение одного часа оцениваются методами спектрофотометрии и сканирующей микрокалориметрии. Была проверена зависимость самосборки молекул коллагена от температур, обычно используемых для изучения фибриллогенеза коллагена: 25, 30, 350C. Полученные данные по изменению оптической плотности растворов коллагена показывают снижение времени для самосборки при увеличении температуры, повышении концентрации и наличии телопептидов. Форма сигмоидных кривых различается и отражает сложный механизм самосборки молекул коллагена типа I в разных условиях. Микрокалориметрические кривые и термодинамические параметры перехода молекул из свободного сотояния в упорядоченное позволяют четко показать влияние температуры ниже и выше 300С для коллагена с телопептидами. При изменении температуры от 30 до 35оС реорганизация молекул коллагена сопровождается снижением температуры денатурации (Тд), полуширины перехода из нативного состояния в денатурированное (DТ), энтальпии перехода (DН), энтропии перехода (DS) и возрастанием степени упорядоченности коллагеновых фибрилл.