СТИМУЛЯЦИЯ A-ЛАТРОТОКСИНОМ ПРОЦЕССА СЕКРЕЦИИ НЕЙРОМЕДИАТОРА
Гришин Е. В., Волынский К. Е., Ушкарев Ю. А.
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, Москва
Процесс секреции нейромедиатора
окончанием нервной клетки осуществляется при участии ряда специализированных
белковых компонентов, локализованных как в пресинаптической мембране,
так и в
мембране синаптичсских везикул. Для исследования молекулярного
механизма секреции и функциональной роли отдельных белковых компонентов
широко используются различные природные нейротоксины и
в первую очередь
токсин из яда паука каракурта - a-латротоксин, вызывающий массированный
выброс нейромедиатора после связывания с рецепторными системами
пресинаптической мембраны позвоночных. В настоящее время
идентифицированы и охарактеризованы два рецептора этого токсина
-нейрексин a и латрофилин. С целью
изучения взаимодействия токсина с его рецепторами и формирования
им мембранных осуществлена
функциональная экспрессия структурных генов латрофилина и нейрексина
a в культивируемых клетках COS7.
Установлено, что для проявления своей порообразующей активности
a-латротоксину достаточно наличия мембранного рецептора и не требуется
взаимодействия с другими пресинаптичсскими белками. Показано,
что a-латротоксин способен эффективно стимулировать вход ионов
кальция внутрь нервного окончания сразу после взаимодействия с
рецепторами. В мембранах COS7-клеток, трансфицированных к ДНК
латрофилина и нейрексина 1a, токсин вызывает образование пор,
проницаемых для незаряженных веществ
с массой до 390 Да. Исследована структурная организация a-латротоксина
и других токсинов каракурта, специфичных для нервных окончаний
насекомых или ракообразных. Локализованы функциональные домены
молекулы токсина, обуславливающие его биологические эффекты.