ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ G -РАДИАЦИИ И B-КАРОТИНА НА СТАБИЛЬНОСТЬ ДНК-МЕМБРАННЫХ КОМПЛЕКСОВ

Круглова Н. Л.
Институт биофизики клетки РАН, 1242292 Пущино
Методами КД-спектроскопии, вискозиметрии и люминесценции обнаружены сверхспирализованные состояния в ДНК-мембранных системах из спермы рыб, подвергнутой облучению малыми дозами радиации в диапазоне от 0,05 - 0,35 Гр. Подобный эффект наблюдали при понижении температуры до +4, +6 оС. Однако при увеличении температуры до +20, +25 оС наблюдается декомпактизация ДНК-мембранных систем in vivo. В исследуемой области не выявляются дополнительные двунитевые разрывы. При облучении также не выявляются дополнительные разрывы. Лишь при 0,3 и 0,35 Гр можно видеть некоторое увеличение двунитевых разрывов (3 - 5%) по сравнению с нормой. При этом b-каротин оказывает нормализующий эффект на 35 - 40% в случае облучения. Обнаружена корреляция между конденсацией ДНК-мембранных систем и репрессией синтеза РНК in vitro. Обработка ДНК-систем фосфолипазами, липазой в сочетании с проназой Е приводит к релаксации системы, к С®В-переходу, к нивелированию скачка теплоемкости и увеличению температуры плавления на 2 - 3 оС. По-видимому, на конформационные перестройки в ДНК в составе комплекса влияет негистоновый кислый белок и входящая в него РНК-полимераза II. В сочетании с минорными липидами этот фермент может индуцировать различные изменения конформационного состояния ДНК, приводящие к конденсации дегистонированного хроматина, поскольку существуют теоретические и некоторые экспериментальные работы in vitro подтверждающие, что именно РНК-полимераза вызывает дополнительное суперскручивание ДНК, приводящее к конденсации. Однако эти работы единичны. В связи с этим автором предпринята попытка реконструировать комплекс в модельных экспериментах in vitro, чтобы дополнительно продемонстрировать компактизацию и декомпактизацию ДНК-системы, которая может происходить при облучении in vivo. Показано, что при реконструкции комплекса с использованием РНК-полимеразы, липидов и коммерческой ДНК наблюдается восстановление скачка теплоемкости и исходной конформации системы ДНК-НГБ-липид.