ВЛИЯНИЕ МАЛЫХ ДОЗ G -РАДИАЦИИ И B-КАРОТИНА НА СТАБИЛЬНОСТЬ ДНК-МЕМБРАННЫХ КОМПЛЕКСОВ
Круглова Н. Л.
Институт биофизики клетки РАН, 1242292 Пущино
Методами КД-спектроскопии,
вискозиметрии и люминесценции обнаружены сверхспирализованные
состояния в ДНК-мембранных системах из спермы рыб, подвергнутой
облучению малыми дозами радиации в диапазоне от 0,05 - 0,35 Гр.
Подобный эффект наблюдали при понижении температуры до +4, +6
оС. Однако при увеличении температуры до +20, +25 оС
наблюдается декомпактизация ДНК-мембранных систем in
vivo. В исследуемой
области не выявляются дополнительные двунитевые разрывы. При облучении
также не выявляются дополнительные разрывы. Лишь при 0,3 и 0,35
Гр можно видеть некоторое увеличение двунитевых разрывов (3 -
5%) по сравнению с нормой. При этом b-каротин оказывает нормализующий
эффект на 35 - 40% в случае облучения. Обнаружена корреляция между
конденсацией ДНК-мембранных систем и репрессией синтеза РНК in
vitro. Обработка
ДНК-систем фосфолипазами, липазой в сочетании с проназой Е приводит
к релаксации системы, к С®В-переходу, к нивелированию скачка теплоемкости
и увеличению температуры плавления на 2 - 3 оС. По-видимому,
на конформационные перестройки в ДНК в составе комплекса влияет
негистоновый кислый белок и входящая в него РНК-полимераза II.
В сочетании с минорными липидами этот фермент может индуцировать
различные изменения конформационного состояния ДНК, приводящие
к конденсации дегистонированного хроматина, поскольку существуют
теоретические и некоторые экспериментальные работы in
vitro подтверждающие,
что именно РНК-полимераза вызывает дополнительное суперскручивание
ДНК, приводящее к конденсации. Однако эти работы единичны. В связи
с этим автором предпринята попытка реконструировать комплекс в
модельных экспериментах in vitro,
чтобы дополнительно продемонстрировать компактизацию и декомпактизацию
ДНК-системы, которая может происходить при облучении in
vivo. Показано,
что при реконструкции комплекса с использованием РНК-полимеразы,
липидов и коммерческой ДНК наблюдается восстановление скачка теплоемкости
и исходной конформации системы ДНК-НГБ-липид.