РАЗРЕШЕННАЯ ВО ВРЕМЕНИ СПЕКТРОСКОПИЯ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ЗОНДОВ: ИЗУЧЕНИЕ СТРУКТУРЫ БЕЛКОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

Сырейщикова Т. И., Якименко М. Н., Добрецов Г. Е., Грызунов Ю. А.
Физический институт им. П.Н. Лебедева РАН, Москва; *НИИ физико-химической медицины Минздрава РФ, Москва; **Daresbury Laboratory, Warrington, UK
В пучке синхротронного излучения Лаборатории Дарсбери было проведено изучение трех типов липопротеинов, выделенных из крови здоровых доноров, искусственных мембран (липосом) и липопротеинов (липидных сфер), а также сывороточного альбумина человека. Использовались флуоресцентные липидные зонды К-37 и К-35, созданные в России. Зонд К-37 является специфическим к липопротеинам, зонд К-35- к альбумину. Три вида параметров использовались для описания динамики липидных систем: 1) времена затухания флуоресценции зондов, 2) числа молекул зонда, испускающих флуоресценцию с различными временами затухания и 3) разрешенная во времени деполяризация флуоресценции. Для зонда К-37 было получено, что каждый из измеренных параметров отражает монотонные изменения динамических свойств в ряду: липидные сферы, липопротеины очень низкой плотности, липопротеины низкой плотности, липопротеины высокой плотности, липосомы. Этот ряд характеризуется увеличением отношения полярных/ неполярных липидов. Был сделан вывод, что разрешенная во времени спектроскопия флуоресцентного зонда К-37 может быть использована для детектирования некоторых структурных модификаций в липопротеинах, связанных с их атерогенностью. С помощью зонда К-35 изучали конформационные переходы в сывороточном альбумине человека, индуцированные изменением pH от 4 до 9. Показано, что интенсивность и средний квантовый выход флуоресценции зонда возрастают в диапазоне pH от 7 до 9 за счет увеличения числа флуоресцирующих молекул зонда. Изучение конформационных изменений в сывороточном альбумине человека, индуцированных изменением pH, дает информацию, полезную для понимания молекулярного механизма нарушения функций альбумина при различных заболеваниях