,
где VR и VT - скорости реакции гидролиза полисахаридов в состоянии молекулы фермента R и T соответственно; Q- конформационная функция.
Зависимость конформационной функции от концентрации субстрата выражали следующим аналитическим уравнением:
,
где n - число субъединиц в молекуле фермента, L0 - константа конформационного перехода из состояние R в состояние Т, S - концентрация субстрата, и - константа Михаэлиса в состоянии R и T соответственно.
Показано, что L0 ферментативной реакции гидролиза крахмала при иммобилизации глюкоамилазы уменьшается (6,69 и 2,1 для свободного и ковалентно связанного фермента соответственно). Для расчета термодинамических параметров ферметативнных реакций использовали уравнение Аррениуса в интегральной форме, изменение энтальпии (DH) определяли по тангенсу угла наклона прямой модифицированной диаграммы Аррениуса, DS рассчитывали по основному термодинамическому уравнению. Установлено, что при иммобилизации на ионитах Еакт. увеличивается, что вполне согласуется с экспериментальными данными по изучению каталитической активности ковалентно связанных амилаз.
Иммобилизации приводит к увеличению и , что может быть связано с диффузионными затруднениями при подходе молекулы субстрата к функциональным группам активного центра иммобилизованного фермента, уменьшением числа степеней свободы третичной структуры, ответственной за каталитические свойства, а также изменением микроокружения полипептидной цепи за счет воздействия матрицы носителя.