ОБНАРУЖЕНИЕ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОГО ТОПОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ДНК В ЛЕЙКОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА КАК АДАПТАЦИОННОЙ РЕАКЦИИ ОРГАНИЗМА К УСЛОВИЯМ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ

Папонов В. Д., Сигора Г. А.
Медико-генетический научный центр РАМН, 115478 Москва
Исследовали лейкоциты периферической крови человека в условиях, вызывающих депротеинизацию хромосомной ДНК и стабильное поддержание ее в виде кольцеобразных суперспирализованных петель нуклеоидов. Стабильное состояние ДНК в нуклеоидах обеспечивалось присутствием 200-кратного избытка гепарина по отношению к ДНК в забуференном растворе физиологической ионной силы (рН 6,0). Измерение вязкости дисперсии нуклеоидов лейкоцитов в процессе титрования ДНК бромидом этидия (EtBr) на ротационном вискозиметре позволило получить кривые титрования с 5-8 максимумами в пределах концентрации EtBr от 0 до 6 мкг/мл при шаге титрования 0,25 мкг/мл EtBr. Последовательное выделение лейкоцитов из замороженных объемов крови донора позволяет получать кривые титрования нуклеоидов с воспроизводимой локализацией максимумов вязкости. Однако при повторных заборах крови у конкретного донора локализация некоторых максимумов меняется, что можно связать с адаптационной реакцией организма к условиям среды обитания человека. Показано, что изменение степени суперспирализации некоторых семейств петель суперспирализованной ДНК лейкоцитов может происходить либо за счет топоизомеразной активности в отдельных клетках, либо за счет изменения популяционного состава лейкоцитов периферической крови, отличающихся друг от друга характером суперспирализации разных семейств кольцеобразных семейств ДНК.