УЛЬТРАЗВУКОВАЯ ДЕЗИНТЕГРАЦИЯ БИООБЪЕКТОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВОЛОКНИСТОГО НАПОЛНИТЕЛЯ

Шестаковский Л. Я., Хохлов А. М.
Институт биологического приборостроения РАН, 142292 Пущино
Ультразвуковая дезинтеграция клеток E. Coli Methilocystis и echinoides в проточной камере ультразвукового дезинтегратора, заполненной стеклянным волокном с силированной поверхностью и объемом волокна 0,1-0,7 от объёма камеры обеспечила более высокую степень дезинтеграции, выход белка, активность ферментов по сравнению с дезинтеграцией без волокнистого наполнителя при одинаковых значениях остальных условий и режимов дезинтеграции. Снижается электрическая мощность, затрачиваемая на дезинтеграцию. Камера дезинтегратора - герметичная, термостатируемая, проточная. Ультразвуковой дезинтегратор автоматически поддерживает постоянство амплитуды и мощности и имеет указатели этих параметров. Клетки E. Coli Methilocystis и echinoides выращены и выделены для приготовления суспензий микроорганизмов общепринятыми стандартными методами. Дезинтеграция проводилась в герметичной проточной камере. Концентрация клеток в суспензии 15*109 кл./мл. Объём дезинтегрируемой суспензии - 60 мл. Режим протока: рециркуляция. Объёмный расход суспензии - 60 мл./мин. Время дезинтеграции - 10 мин. Температура суспензии поддерживалась в пределах от 2 до 8 °С. Частота колебаний наконечника -22 КГц, амплитуда - 14-16 мкм, мощность дезинтеграции -100 Вт. Волокнистый наполнитель представляет собой стеклянные волокна диаметром 8-12 мкм с силированной поверхностью, а его объём составляет 0,1-0,7 от объёма камеры дезинтеграции. Проведение ультразвуковой дезинтеграции микроорганизмов в камере с волокнистым наполнителем показывает, что при уменьшенной в 2 раза амплитуде колебаний вибратора, эффективность дезинтеграции возрастала в 1,2-3 раза. При этом мощность оставалась на одном и том же уровне с контрольными опытами (без наполнителя), а выход белка увеличивался в 1,5-3 раза по сравнению с контролем. Использование при дезинтеграции волокнистого наполнителя приводит к снижению мощности в 1,2-3 раза.