УЛЬТРАЗВУКОВАЯ ДЕЗИНТЕГРАЦИЯ БИООБЪЕКТОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВОЛОКНИСТОГО НАПОЛНИТЕЛЯ
Шестаковский Л. Я., Хохлов А. М.
Институт биологического приборостроения РАН, 142292 Пущино
Ультразвуковая дезинтеграция
клеток E. Coli Methilocystis и echinoides в проточной
камере ультразвукового дезинтегратора, заполненной стеклянным
волокном с силированной поверхностью и объемом волокна 0,1-0,7
от объёма камеры обеспечила более высокую степень дезинтеграции,
выход белка, активность ферментов по сравнению с дезинтеграцией
без волокнистого наполнителя при одинаковых значениях остальных
условий и режимов дезинтеграции. Снижается электрическая мощность,
затрачиваемая на дезинтеграцию. Камера дезинтегратора -
герметичная, термостатируемая, проточная. Ультразвуковой дезинтегратор
автоматически поддерживает постоянство амплитуды и мощности и
имеет указатели этих параметров. Клетки E. Coli
Methilocystis и echinoides выращены и выделены для
приготовления суспензий микроорганизмов общепринятыми стандартными
методами. Дезинтеграция проводилась в герметичной проточной
камере. Концентрация клеток в суспензии 15*109
кл./мл. Объём дезинтегрируемой суспензии - 60
мл. Режим протока: рециркуляция. Объёмный расход суспензии -
60 мл./мин. Время дезинтеграции - 10 мин. Температура
суспензии поддерживалась в пределах от 2 до 8 °С.
Частота колебаний наконечника -22 КГц, амплитуда -
14-16 мкм, мощность дезинтеграции -100 Вт. Волокнистый
наполнитель представляет собой стеклянные волокна диаметром 8-12
мкм с силированной поверхностью, а его объём составляет 0,1-0,7
от объёма камеры дезинтеграции. Проведение ультразвуковой
дезинтеграции микроорганизмов в камере с волокнистым наполнителем
показывает, что при уменьшенной в 2 раза амплитуде колебаний вибратора,
эффективность дезинтеграции возрастала в 1,2-3 раза. При этом
мощность оставалась на одном и том же уровне с контрольными опытами
(без наполнителя), а выход белка увеличивался в 1,5-3 раза по
сравнению с контролем. Использование при дезинтеграции
волокнистого наполнителя приводит к снижению мощности в 1,2-3
раза.