ПРОВОДИМОСТЬ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ КОНТАКТОВ КЛЕТОК BHK-21 ПРИ ТРАНСМЕМБРАННЫХ ГРАДИЕНТАХ HCO3(-) И NH4(+)

Дунина-Барковская А. Я., Вужурина И. М., Пивоваров В. С., Фролов В. А.
НИИ ФХБ им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова, 119899 Москва; *Институт физики Ст.-Петербургского Университета, Ст.-Петербург; **Институт Электрохимии им. А.Н.Фрумкина РАН, Москва
Слабые кислоты являются эффективными блокаторами проводимости щелевых контактов (ЩК). Согласно общепринятой гипотезе, механизм действия слабых кислот состоит в прямом протонировании коннексинов - белков, формирующих ЩК, при закислении цитоплазмы. Такой механизм предполагает, что эффективность блокады ЩК должна определяться только внутриклеточным рН (рНвнут) независимо от способа снижения рН. Мы сравнили поведение проводимости ЩК у клеток ВНК в условиях трансмембранных градиентов концентрации бикарбоната и аммония. Такие градиенты, создаваемые в конфигурации "двойное отведение от целой клетки" (double whole-cell) с помощью соответствующих сочетаний внутриклеточных (т.е. заполняющих пэтч-пипетки) и внеклеточных растворов, должны смещать рНвнут согласно уравнениям: рНвнут = рНвнеш - lg{[HCO3-]внеш/[HCO3-]внут}или рНвнут = рНвнеш - lg{[NH4+]внут/[NH4+]внеш}. Результаты экспериментов показали, что контактная проводимость (Gk) клеток ВНК зависити от способа снижения рН. Так, в условиях 500-кратного градиента бикарбоната (рассчитанный рНвнут ~ 4,8) Gk оставалась высокой, а 10-кратный ґрадиент аммония (рассчитанный рН ~ 6,1) вызывал быстрое разобщение клеток. Изменения Gk сопровождались изменениями проводимости неконтактных мембран, что свидетельствует о генерализованном действии бикарбоната и аммония в условиях экспериментов. Мы предполагаем, что механизм эффектов слабых кислот/оснований на проводимость ЩК, помимо чисто "протонной" компоненты, имеет дополнительную неспецифическую компоненту за счет присутствия в клеточной мембране недиссоциированной формы слабой кислоты или основания.