ПРОВОДИМОСТЬ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ КОНТАКТОВ КЛЕТОК BHK-21 ПРИ ТРАНСМЕМБРАННЫХ ГРАДИЕНТАХ HCO3(-) И NH4(+)
Дунина-Барковская А. Я., Вужурина И. М., Пивоваров В. С., Фролов В. А.
НИИ ФХБ им. А.Н. Белозерского МГУ им. М.В. Ломоносова, 119899 Москва; *Институт физики Ст.-Петербургского Университета, Ст.-Петербург; **Институт Электрохимии им. А.Н.Фрумкина РАН, Москва
Слабые кислоты являются
эффективными блокаторами проводимости щелевых контактов (ЩК).
Согласно общепринятой гипотезе, механизм действия слабых кислот
состоит в прямом протонировании коннексинов - белков, формирующих
ЩК, при закислении цитоплазмы. Такой механизм предполагает, что
эффективность блокады ЩК должна определяться только внутриклеточным
рН (рНвнут) независимо от способа снижения рН. Мы сравнили
поведение проводимости ЩК у клеток ВНК в условиях трансмембранных
градиентов концентрации бикарбоната и аммония. Такие градиенты,
создаваемые в конфигурации "двойное отведение от целой клетки"
(double whole-cell) с помощью соответствующих сочетаний внутриклеточных
(т.е. заполняющих пэтч-пипетки) и внеклеточных растворов, должны
смещать рНвнут согласно уравнениям: рНвнут
= рНвнеш - lg{[HCO3-]внеш/[HCO3-]внут}или
рНвнут = рНвнеш - lg{[NH4+]внут/[NH4+]внеш}.
Результаты экспериментов показали, что контактная проводимость
(Gk) клеток ВНК зависити от способа снижения
рН. Так, в условиях 500-кратного градиента бикарбоната (рассчитанный
рНвнут ~ 4,8) Gk оставалась высокой,
а 10-кратный ґрадиент аммония (рассчитанный рН ~ 6,1) вызывал
быстрое разобщение клеток. Изменения Gk сопровождались
изменениями проводимости неконтактных мембран, что свидетельствует
о генерализованном действии бикарбоната и аммония в условиях экспериментов.
Мы предполагаем,
что механизм эффектов слабых кислот/оснований на проводимость
ЩК, помимо чисто "протонной" компоненты, имеет дополнительную
неспецифическую компоненту за счет присутствия в клеточной мембране
недиссоциированной формы слабой кислоты или основания.