РАСПРЕДЕЛЕНИЕ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ФОТОСЕНСА, НОВОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА, В ЖИВЫХ КЛЕТКАХ ПО ДАННЫМ МЕТОДА КОНФОКАЛЬНОЙ МИКРОСПЕКТРОСКОПИИ

Феофанов А. В., Гришин А. И., Шитова Л. А., Куделина И. А., Кармакова Т. А., Якубовская Р. И., Эгрет-Шарлье М., Вини П.
Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, 117871 Москва; *Московский научно-исследовательский институт им. П. А. Герцена, 125284 Москва; **Centre de Biophysique Moleculaire, C.N.R.S., 45071 Orleans, France
В данной работе методом КОМИРСИ изучался фотосенс (Фс) - фотосенсибилизатор второго поколения на основе смеси ди-, три- и тетрасульфированных производных фталоцианина алюминия (AlPcS2, AlPcS3, AlPcS4 соответственно). Методом КОМИРСИ на живых клетках аденокарциномы легкого человека А549 исследовали внутриклеточную локализацию, фармакокинетику, взаимодействия Фс, а также его компонентов AlPcS2, AlPcS3, AlPcS4. Изучение клеточной фармакокинетики Фс показало, что его проникновение в клетки происходит за время меньше 1 мин. В течение первых 30 мин инкубации внутриклеточная концентрация Фс быстро увеличивается, выходит на насыщение (10 - 20% от концентрации Фс в среде) и в последующие несколько часов возрастает очень слабо. Уже через 10 мин инкубации клеток с Фс формируется характерная картина его относительного распределения. При этом Фс локализован как в цитоплазме, так и в ядре клетки. В цитоплазме препарат концентрируется вблизи ядра, по-видимому, в митохондриях. Выведение препарата из клеток происходит медленно. В течение 1 ч инкубации клеток в среде без Фс внутриклеточная концентрация препарата снижается в 2 - 3 раза. Дальнейшее выведение Фс резко замедляется. Значительная доля Фс удерживается в цитоплазме и в меньшей степени в ядрах клеток в течение не менее 29 час после удаления препарата из внешней среды. Спектральный анализ позволил установить, что компонент AlPcS2 и большая часть AlPcS3 в цитоплазме находятся в свободном состоянии. Часть компонента AlPcS3 и большая доля AlPcS4 в цитоплазме связаны с белками и мембранными структурами. В ядре весь Фс связан с белками. Обнаружено, что уровень накопления в клетке и распределение в клеточных компартментах зависят от степени сульфирования фталоцианина алюминия. Так, в ряду AlPcS2, AlPcS3, AlPcS4 снижается способность проникновения в клетку, и возрастает тенденция проникновения в ядро.