МЕТОД ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ ВАКУУМНОЙ ВСПЫШКИ

Журавлев А. И.
(Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии, кафедра биофизики, 109472 Москва
Метод выявляет степень дисоциации в вакууме нестойких веществ до активных свободных радикалов, способных вступать в быстрые реакции с кислородом с образованием электронных возбужденных состояний и спонтанной хемилюминесценции. Субстраты - липиды, липидные препараты и другие вещества, способные к автоокислению. Подготовка к измерению. Препараты помещаются в стеклянные емкости (пробирки, пузырьки...) и запаиваются лучше под вакуумом. В замкнутом сосуде небольшой объем кислорода воздуха быстро связывается субстратом и создается пониженное парциальное давление кислорода или вакуум. Запаенные образцы хранятся в темноте различные сроки при различных температурах от 0 до 60°С. Условия измерения. Измерение спонтанной хемилюминесценции проводят в темноте до запаивания, до и сразу после нарушения герметичности. Время измерения зависит от динамики измерений. Измерения проводят при температуре 37°С (от 20 до 60°С) в темноте, на установке для измерения сверхслабых световых потоков по методу Б.Н.Тарусова (Биофизика, 1961, №4, с.490-492; Биофизика, 1991, №3, с.489-496). В исходном состоянии липидные препараты, например, рыбий жир, спонтанно хемилюминесцируют с интенсивностью @ n.102 квант/сек.см2; в герметическом сосуде интенсивность свечения падает ниже порога чувствительности установки @ n.101 квант/сек.см2. После вскрытия сосуда и доступа кислорода воздуха в течении 1-2 минут наблюдается резкое, в 10-100 раз усиление (вспышка) хемилюминесценции. Амплитуда вспышки медленно за 30-60 минут снижается до уровня близкого к исходному. Амплитуда вспышки пропорциональна исходному содержанию перекисей, времени и температуре хранения. Метод характеризует устойчивость препарата к хранению в вакууме. Проверка образцов длительного хранения медицинского рыбьего жира показала возникновение "мощных" вспышек, т.е. высоких концентраций свободных радикалов, что и является основой их токсичности и отравления детей при употреблении таких длительно хранящихся препаратов. Показано, что длительное хранение в вакууме или в герметичной таре не сохраняет липидные образцы от разложения.