ВЫЯВЛЕНИЕ АГРЕГАТНЫХ СОСТОЯНИЙ ДНК-ЛИПИДНЫХ КОМПЛЕКСОВ С ПОМОЩЬЮ МИКРОКАЛОРИМЕТРИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Хусаинова Р. С., Попов В. И., Иваницкий Г. Р., Даусон К. А., Рочев Ю. Л.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино; * Институт биофизики клетки РАН, 142292 Пущино; **Дублинский Университет-колледж, Ирландия
Для создания эффективных средств доставки генетического материала внутрь клетки важны структурные исследования ДНК-липидного взаимодействия. В настоящей работе проводится сравнительное микрокалориметрическое исследование влияния ДНК на фазовые переходы многослойных везикул дипальмитоилфосфатидилхолина (ДПФХ) при разных молярных соотношениях нуклеотид/липид: 1/30 и 1/1. Показано, что при низком молярном соотношении 1/30 мультислойные везикулы имеют два фазовых перехода: основной фазовый переход ДПФХ в присутствии Са2+ в области 42,2°С и фазовый переход провзаимодействовавшего с ДНК посредством катионов Са2+ ДПФХ в области 43,1°С. При эквимолярном соотношении нуклеотид/липид появляется третий фазовый переход в области 44,1°С. Появление третьего фазового перехода свидетельствует о наличии в препарате сильно иммобилизованных молекул ДПФХ. Можно предположить, что наиболее сильная иммобилизация молекул ДПФХ молекулами ДНК достигается во внутренних бислоях ДПФХ, заключенных между несколькими молекулами ДНК в "слоенном пироге" агрегата комплексов. А это означает, что существование третьего фазового перехода в области 44,1°С свидетельствует об агрегации комплексов. Данное предположение подтверждается фотографиями электронной микроскопии и термограммами микрокалориметрического сканирования. Таким образом, результаты настоящих исследований позволяют использовать микрокалориметрические исследования для выявления агрегированного состояния комплексов. Работа выполнена при финансовой поддержке грантов INTAS-93-2084, РФФИ-96-04-48192, РФФИ-97-04-48404.