ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ АРАХИДОНОВОЙ КИСЛОТЫ С НМДА-КАНАЛАМИ ПИРАМИДНЫХ НЕЙРОНОВ ГИППОКАМПА КРЫСЫ

Елшанская М. В., Соболевский А. И., Ходоров Б. И.
Институт общей патологии и патофизиологии РАМН, 125315 Москва
Взаимодействие арахидоновой кислоты (АК) с НМДА-каналами пирамидных нейронов гиппокампа крысы было исследовано методом пэтч-кламп в конфигурации "целая клетка". Токи через НМДА-каналы вызывали аппликацией 100 мкМ аспартата (АСП) в безмагниевой среде, содержащей 3 мкМ глицин. При одновременном применении АСП и АК (10 мкМ) возникал ток, пиковая величина которого практически не отличалась, а стационарная в 1,2+2 раза превышала стационарную величину контрольного тока. После 10-60 с предаппликации АК (10 мкМ) ток в ответ на применение АСП превышал контрольный. Однако в этом случае пиковая величина тока увеличивалась в 1,5+2 раза сильнее, чем стационарная. Кинетика потенциации пиковой величины тока существенно отличалась от кинетики потенциации его стационарной величины. Кинетика потенциации стационарной величины определялась взаимодействием АК с открытыми НМДА-каналами. Константы связывания и диссоциации для открытых каналов, определенные в экспериментах, в которых АК применялась в непрерывном присутствии АСП в растворе, оказались k1 = 20,0±2,7 с-1 мМ-1 и k2=0,089±0,003 с-1 соответственно. Кинетика потенциации пиковой величины тока определялась взаимодействием АК с закрытыми НМДА-каналами и оказалась существенно медленнее, чем для стационарной. Так, константы связывания и диссоциации АК для закрытых каналов были оценены с помощью математического моделирования как k3=0,004 с-1 мкМ-1 и k4=0,03 с-1 соответственно. Потенциация токов, вызванная АК, не зависела от мембранного потенциала в диапазоне от -100 до 40 мВ и присутствия восстанавливающего SH-агента дитиотрейтола (DTT). Добавление на 15 мин во внеклеточную среду ингибитора циклооксигеназы индометацина (5 мкМ) не изменяло действия АК, что свидетельствовало о том, что действие АК не связано с продуктами ее циклооксигеназного расщепления. Эксперименты по применению АК совместно с тетрапентиламмонием (0,5 мМ) позволили предположить, что 10 мкМ АК повышает вероятность открывания НМДА-каналов в 2,3±0,5 раза и увеличивает их десенситизацию в 1,4±0,1 раза, что хорошо согласуется с данными предыдущих исследований (Miller et al., 1992, Casado and Ascher, 1998). Работа поддержана РФФИ.