ФИЛЬТРАЦИОННО-ОСМОТИЧЕСКИЙ МЕТОД ОЦЕНКИ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ ПО РЕОЛОГИЧЕСКИМ ПАРАМЕТРАМ

Лисовская И. Л., Шурхина Е. С., Нестеренко В. М., Розенберг Ю. М., Атауллаханов Ф. И.
Гематологический научный центр РАМН, 125167 Москва
Большинство методов измерения деформируемости эритроцитов характеризует усредненные по всей исследуемой суспензии реологические свойства эритроцитов, не позволяя оценить отдельные субпопуляции. Нами разработаны две модификации фильтрационно-осмотического метода (ФИОМ), позволяющие, используя гемореометр (вариант гемореометра Хансса) с мембранными фильтрами (средний диаметр пор 3 мкм) и варьируя осмотичность ресуспендирующей среды u, определять относительное содержание нефильтрующихся клеток в суспензии как функцию u. Первая модификация (метод последовательного отмывания фильтра) основана на измерении зависимости количества необратимо забитых пор от числа нанесенных на фильтр эритроцитов. При этом определяют процентное содержание Z нефильтрующихся эритроцитов. Зависимость Z от u представляет собой интегральное распределение эритроцитов в суспензии по ucr (осмотичности, при которой эритроцит достигает критического объема Vcr, не позволяющего ему пройти через пору). Вторая (методически более простая) модификация основана на измерении зависимости скорости протекания через фильтр фиксированного объема суспензии эритроцитов от u. По мере снижения u эта скорость уменьшается, обращаясь в ноль при u=Ucr. При этом количество нефильтрующихся клеток приблизительно равно числу пор на фильтре. Определив Ucr для суспензий с различными значениями гематокрита (например, 0.1% и 1%), можно оценить характер распределения эритроцитов по ucr. Величина Ucr(0.1%) приблизительно равна ucr для основной субпопуляции клеток, а разность Ucr(1%)- Ucr(0.1%) может служить показателем ширины распределения, т.к. при u " Ucr(1%) Z " 3-4%. Результаты, полученные с помощью обеих модификаций ФИОМ, хорошо согласуются. В норме эритроциты имеют максимум дифференциального распределения по ucr при u " 190 мОсм/кг и полуширину " 20 мОсм/кг. Характер распределения изменяется при некоторых патологиях и повреждающих воздействиях. В крови больных с микросфероцитозом, а также в суспензиях консервированных и криоконсервированных эритроцитов и эритроцитов, истощенных по АТФ в бескальциевой среде, наблюдается сдвиг распределения в сторону более высоких значений u, что свидетельствует о снижении отношения площади поверхности к объему (S/MCV) для основной субпопуляции клеток.. При этом наблюдается существенное уширение распределения. Истощение эритроцитов по АТФ в среде, содержащей 1 мМ Са, приводит к сдвигу распределения по ucr в сторону меньших значений u (увеличение S/MCV) и тоже сопровождается уширением распределения. Применение ФИОМ позволяет получить ценную информацию о свойствах эритроцитов в исследуемой крови. Метод дает возможность количественно охарактеризовать изменения реологических свойств как основной массы, так и малых субпопуляций эритроцитов.