РЕГУЛЯЦИЯ СКОРОСТИ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ ВСПЫШКИ В ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ НЕЙТРОФИЛАХ МЫШЕЙ С ПОМОЩЬЮ СЛАБЫХ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ

Белова Н. А., Поцелуева М. М., Юрков И. С., Леднев В. В.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино
Известно, что генерация активных форм кислорода (АФК) нейтрофилами, стимулированными форболовым эфиром или формилпептидами, является конечным звеном в цепи биохимических реакций опосредуемых, в частности, протеинкиназой С (ПКС). С другой стороны, теоретические и экспериментальные данные свидетельствуют о том, что биоэффекты слабых магнитных полей (МП) обусловлены их влиянием на скорость некоторых Са2+-зависимых биохимических реакций фосфорилирования, осуществляемых прежде всего ПКС и кальмодулинзависимыми киназами. Исходя из этих соображений, мы исследовали возможность влияния слабых МП на скорость генерации АФК в нейтрофилах. Суспензии зимозанвызванных перитонеальных нейтрофилов получали по стандартной методике с использованием мышей самок NMRI-линии весом 20 - 25 грамм. Каждая из экспериментальных и контрольных тест-кювет содержала 0,5 мл суспензии нейтрофилов в растворе Хенкса при концентрации 106 клеток/мл, люминол 10-5 М и стимулирующий агент - форбол 12-миристат 13-ацетат (PMA), или N-формил-метионил-лейцил -фенилаланин (fMLP) 10-8 - 10-7 М. Скорость генерации АФК регистрировали с помощью одноканального хемилюминометра при комнатной температуре. В большинстве случаев в экспериментальное и контрольное магнитные поля помещали по 3 тест-кюветы. Интенсивность хемилюминесценции в тест-кюветах измеряли через каждые 2 минуты, при этом время измерения составляло 15 секунд. Контрольные тест-кюветы были экспонированы в локальном МП, экспериментальные - в магнитных полях двух типов: (1) комбинированное МП, настроенное на резонанс для Са2+ (Са2+-КМП) и (2) импульсное МП (ИМП), представляющее собой последовательности из 119 коротких импульсов (длительность 260 сек, амплитуда 100 мкТл), повторяющейся с частотой 1,5 Гц. Экспонирование РМА - активированных нейтрофилов в Са2+-КМП сопровождается снижением скорости генерации АФК на 40 - 50 % в fMLP-активированных нейтрофилах. Воздействие ИМП также приводит к изменению скорости продукции АФК примерно на 50%, однако знаки эффектов в этом случае противоположны тем, которые наблюдаются при использовании Са2+-КМП. Полученные результаты свидетельствуют о возможности существенной продукции АФК в нейтрофилах с помощью слабых МП. Данные, полученные в опытах с РМА-активированными нейтрофилами, подтверждают гипотезу о том, что изменение активности ПКС является начальным звеном во взаимодействии слабых МП с биосистемами. Зависимость знака эффектов МП от типа стимулирующего агента можно объяснить, исходя из известных представлений относительно отрицательной обратной связи между ферментативной активностью фосфолипазы С и ПКС в fMLP-индуцированных нейтрофилах.