РЕГУЛЯЦИЯ СКОРОСТИ ОКИСЛИТЕЛЬНОЙ ВСПЫШКИ В ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ НЕЙТРОФИЛАХ МЫШЕЙ С ПОМОЩЬЮ СЛАБЫХ МАГНИТНЫХ ПОЛЕЙ
Белова Н. А., Поцелуева М. М., Юрков И. С., Леднев В. В.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино
Известно, что генерация
активных форм кислорода (АФК) нейтрофилами, стимулированными форболовым
эфиром или формилпептидами, является конечным звеном в цепи биохимических
реакций опосредуемых, в частности, протеинкиназой С (ПКС). С другой
стороны, теоретические и экспериментальные данные свидетельствуют
о том, что биоэффекты слабых магнитных полей (МП) обусловлены
их влиянием на скорость некоторых Са2+-зависимых биохимических
реакций фосфорилирования, осуществляемых прежде всего ПКС и кальмодулинзависимыми
киназами. Исходя из этих соображений, мы исследовали возможность
влияния слабых МП на скорость генерации АФК в нейтрофилах. Суспензии
зимозанвызванных перитонеальных нейтрофилов получали по стандартной
методике с использованием мышей самок NMRI-линии весом 20 -
25 грамм. Каждая из экспериментальных и контрольных тест-кювет
содержала 0,5 мл суспензии нейтрофилов в растворе Хенкса при концентрации
106 клеток/мл, люминол 10-5 М и стимулирующий
агент - форбол 12-миристат 13-ацетат (PMA), или N-формил-метионил-лейцил -фенилаланин
(fMLP) 10-8 - 10-7 М. Скорость генерации
АФК регистрировали с помощью одноканального хемилюминометра при
комнатной температуре. В большинстве случаев в экспериментальное
и контрольное магнитные поля помещали по 3 тест-кюветы. Интенсивность
хемилюминесценции в тест-кюветах измеряли через каждые 2 минуты,
при этом время измерения составляло 15 секунд. Контрольные тест-кюветы
были экспонированы в локальном МП, экспериментальные - в
магнитных полях двух типов: (1) комбинированное МП, настроенное
на резонанс для Са2+ (Са2+-КМП) и (2) импульсное
МП (ИМП), представляющее собой последовательности из 119 коротких
импульсов (длительность 260 сек, амплитуда 100 мкТл), повторяющейся
с частотой 1,5 Гц. Экспонирование РМА - активированных нейтрофилов
в Са2+-КМП сопровождается снижением скорости генерации
АФК на 40 - 50 % в fMLP-активированных нейтрофилах. Воздействие
ИМП также приводит к изменению скорости продукции АФК примерно
на 50%, однако знаки эффектов в этом случае противоположны тем,
которые наблюдаются при использовании Са2+-КМП. Полученные
результаты свидетельствуют о возможности существенной продукции
АФК в нейтрофилах с помощью слабых МП. Данные, полученные в опытах
с РМА-активированными нейтрофилами, подтверждают гипотезу о том,
что изменение активности ПКС является начальным звеном во взаимодействии
слабых МП с биосистемами. Зависимость знака эффектов МП от типа
стимулирующего агента можно объяснить, исходя из известных представлений
относительно отрицательной обратной связи между ферментативной
активностью фосфолипазы С и ПКС в fMLP-индуцированных нейтрофилах.