СЕГРЕГАЦИЯ МНОГОЯДЕРНЫХ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК НА НЕСКОЛЬКО ПОДВИЖНЫХ ДОМЕНОВ

Александрова А. Ю., Дугина В. Б., Иванова О. Ю., Каверина И. Н., Васильев Ю. М.
Институт физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского, МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва
Известно, что обработка эпителиальных клеток белковым фактором роста - "скеттер-фактором" (HGF/SF) - приводит к образованию активной ламеллярной цитоплазмы, нарушению межклеточных контактов и в конечном итоге к разбеганию клеток из островков и их поляризации. Мы исследовали действие HGF/SF на многоядерные эпителиальные клетки, представляющие собой модель "супер-объединенной" структуры, когда отдельные клетки не просто контактируют друг с другом, но слиты в единую цитоплазму. Нами было показано, что и в этом случае HGF/SF вызывает существенную перестройку всей морфологии клетки и ведет к ее сегрегации на несколько отдельных доменов. При этом можно выделить два типа образующихся доменов, обладающих различными свойствами. Первый тип - ламеллопласт - хорошо распластанный и прикрепленный к субстрату участок клетки, способный самостоятельно и практически независимо от других перемещаться по субстрату. Ламеллопласты совсем отделялись от клетки довольно редко и оставались соединены друг с другом цилиндрическими участками, которые мы назвали тубулопластами. Тубулопласты не прикреплены к субстрату и не способны к самостоятельному перемещению. Клеточные ядра в процессе сегрегации случайным образом размещались в ламеллопластах, т.е. встречались ламеллопласты как с несколькими ядрами, так и вообще без них. У ламеллопластов хорошо выражена ламеллярная цитоплазма. С помощью иммунофлуоресценции в них окрашивались небольшие пучки актина и ярко выраженные фокальные контакты. Так же хорошо различима сеть промежуточных филаментов, виментина и кератина, характерных для линии клеток MDCK, и сеть микротрубочек. Было показано, что во всех ламеллопластах присутствует центросома. В тубулопластах нет ядер, не обнаруживается центросом, но выявлены промежуточные филаменты и микротрубочки. Было показано, что для подобной реорганизации клеток существенным является наличие интактной системы микротрубочек. Вещества, нарушающие эту систему - колцемид или таксол, - ингибировали сегрегацию. Способность к сегрегации на отдельные подвижные домены является фундаментальным свойством клеток, которое наблюдается при различных процессах клеточных преобразований. Описанная нами система может служить хорошей моделью для исследования механизмов этого явления.