СЕГРЕГАЦИЯ МНОГОЯДЕРНЫХ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК НА НЕСКОЛЬКО ПОДВИЖНЫХ ДОМЕНОВ
Александрова А. Ю., Дугина В. Б., Иванова О. Ю., Каверина И. Н., Васильев Ю. М.
Институт физико-химической биологии им. А.Н.Белозерского, МГУ им. М.В.Ломоносова, Москва
Известно, что обработка
эпителиальных клеток белковым фактором роста - "скеттер-фактором"
(HGF/SF) - приводит к образованию активной ламеллярной цитоплазмы,
нарушению межклеточных контактов и в конечном итоге к разбеганию
клеток из островков и их поляризации. Мы исследовали действие
HGF/SF на многоядерные эпителиальные клетки, представляющие собой
модель "супер-объединенной" структуры, когда отдельные
клетки не просто контактируют друг с другом, но слиты в единую
цитоплазму. Нами было показано, что и в этом случае HGF/SF вызывает
существенную перестройку всей морфологии клетки и ведет к ее сегрегации
на несколько отдельных доменов. При этом можно выделить два типа
образующихся доменов, обладающих различными свойствами. Первый
тип - ламеллопласт - хорошо распластанный и прикрепленный
к субстрату участок клетки, способный самостоятельно и практически
независимо от других перемещаться по субстрату. Ламеллопласты
совсем отделялись от клетки довольно редко и оставались соединены
друг с другом цилиндрическими участками, которые мы назвали тубулопластами.
Тубулопласты не прикреплены к субстрату и не способны к самостоятельному
перемещению. Клеточные ядра в процессе сегрегации случайным образом
размещались в ламеллопластах, т.е. встречались ламеллопласты как
с несколькими ядрами, так и вообще без них. У ламеллопластов хорошо
выражена ламеллярная цитоплазма. С помощью иммунофлуоресценции
в них окрашивались небольшие пучки актина и ярко выраженные фокальные
контакты. Так же хорошо различима сеть промежуточных филаментов,
виментина и кератина, характерных для линии клеток MDCK, и сеть
микротрубочек. Было показано, что во всех ламеллопластах присутствует
центросома. В тубулопластах нет ядер, не обнаруживается центросом,
но выявлены промежуточные филаменты и микротрубочки. Было показано,
что для подобной реорганизации клеток существенным является наличие
интактной системы микротрубочек. Вещества, нарушающие эту систему -
колцемид или таксол, - ингибировали сегрегацию. Способность
к сегрегации на отдельные подвижные домены является фундаментальным
свойством клеток, которое наблюдается при различных процессах
клеточных преобразований. Описанная нами система может служить
хорошей моделью для исследования механизмов этого явления.