СИНТЕЗ СПИН-МЕЧЕНЫХ ПЕПТИДОВ ИЗ СОСТАВА БЕЛКОВ ВИРУСОВ ГЕПАТИТА В И D И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С АНТИТЕЛАМИ МЕТОДОМ ЭПР

Чумаков В. М., Семилетов Ю. А., Прокудина Е. Н.
НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН, 123098 Москва
В последние годы синтетические пептиды нашли широкое применение в прикладных и фундаментальных исследованиях. В частности, в качестве инструментов, способствующих пониманию природы взаимодействий антиген-антитело на молекулярном уровне. Нами осуществлен синтез спин-меченых антигеноактивных пептидов из состава HDAg (а.о. 65-80, 169-179 и 201-211), а также спин-меченого фрагмента а.о. 24-41 preS1 области поверхностного белка HBV. В состав пептидов вводили дополнительный остаток S-ацетамидметил-цистеина для присоединения иод-ацетамидной спин-метки к SH-группам пептида после селективного удаления Асm-защитной группы. Измерение спектров ЭПР показало закономерное снижение подвижности спин-метки, присоединенной к пептиду. Взаимодействие спин-меченых пептидов в концентрации от 10-8 до 10-9 М/мл (не менее 0,5 мкг/мл) с антипептидными сыворотками приводило к 20%-му снижению вращательной подвижности пептида в результате взаимодействия со специфическими антителами. Однако не наблюдалось какого-либо изменения подвижности пептидов при использовании контрольных сывороток. Таким образом, показана принципиальная возможность использования спин-меченых пептидов для обнаружения специфических антител в сыворотках лабораторных животных и в крови больных вирусными гепатитами B и D.