СИНТЕЗ СПИН-МЕЧЕНЫХ ПЕПТИДОВ ИЗ СОСТАВА БЕЛКОВ ВИРУСОВ ГЕПАТИТА В И D И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ С АНТИТЕЛАМИ МЕТОДОМ ЭПР
Чумаков В. М., Семилетов Ю. А., Прокудина Е. Н.
НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН, 123098 Москва
В последние годы синтетические
пептиды нашли широкое применение в прикладных и фундаментальных
исследованиях. В частности, в качестве инструментов, способствующих
пониманию природы взаимодействий антиген-антитело на молекулярном
уровне. Нами осуществлен синтез спин-меченых антигеноактивных
пептидов из состава HDAg (а.о. 65-80, 169-179 и 201-211), а также
спин-меченого фрагмента а.о. 24-41 preS1 области поверхностного
белка HBV. В состав пептидов вводили дополнительный остаток S-ацетамидметил-цистеина
для присоединения иод-ацетамидной спин-метки к SH-группам пептида
после селективного удаления Асm-защитной группы. Измерение спектров
ЭПР показало закономерное снижение подвижности спин-метки, присоединенной
к пептиду. Взаимодействие спин-меченых пептидов в концентрации
от 10-8 до 10-9 М/мл (не менее 0,5 мкг/мл) с антипептидными сыворотками
приводило к 20%-му снижению вращательной подвижности пептида в
результате взаимодействия со специфическими антителами. Однако
не наблюдалось какого-либо изменения подвижности пептидов при
использовании контрольных сывороток. Таким образом, показана принципиальная
возможность использования спин-меченых пептидов для обнаружения
специфических антител в сыворотках лабораторных животных и в крови
больных вирусными гепатитами B и D.