МОДИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ ЦИТОСКЕЛЕТА ПРИ ТЕМПЕРАТУРНО-ОСМОТИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА КЛЕТКИ

Бабийчук Л. А., Землянских Н. Г.
Институт проблем криобилогии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Исследованы особенности темперагурно-зависимых перестроек плазматических мембран, прежде всего белков цитоскелета, модифицирующих устойчивость клеток при криоконсервировании. Установлено, что обработка эритроцитов криопротектором ПЭО-1500 при 0°С приводит к формированию более прочной, чем в нативных клетках, фиксации группы белков цитоскелета, что позволяет сохранить при криоконсервации структуру спектрин-актиновой сети клеток близкой к нативной. В результате эритроциты приобретают повышенную устойчивость к последующему замораживанию-отогреву по сравнению с клетками, обработанными криопротектором при 22°С. Участие белков цитоскелета в температурно-осмотической стабилизации клеток предполагает реализацию довольно сложного механизма, связанного с дегидратацией клеток, перераспределением ионов, особенно ионов кальция, а также активацией других систем вторичных мессенджеров клетки. Исследование процессов фосфорилирования мембранных белков в белых тенях, получаемых после обработки эритроцитов криопротектором ПЭО-1500 в присутствии г-32Р-АТФ, показало, что инкубация при 0°С сопровождается увеличением включения 32Р в спектрин в два раза по сравнению с нативными эритроцитами, причем повышенный уровень фосфорилирования спектрина сохраняется и после замораживания-отогрева эритроцитов, экспонированных при 0°С с ПЭО-1500. Инкубация при комнатной температуре и последующее замораживание-отогрев не вызывает подобного эффекта. Этот факт отражает, по-видимому, особенности структурной модификации спектрина в данных условиях, поскольку известно, что при 0°С энергетически более выгодной становится олигомерная структура спектрина, а уровень фосфорилирования олигомерных форм более, чем в 2 раза превышает уровень фосфорилирования димеров и тетрамеров. Усиление ассоциативных связей в спектрин-спектриновом взаимодействии, происходящее в данных условиях, может приводить к повышению стабильности клеток к действию замораживания-отогрева.