МОДИФИКАЦИЯ БЕЛКОВ ЦИТОСКЕЛЕТА ПРИ ТЕМПЕРАТУРНО-ОСМОТИЧЕСКОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА КЛЕТКИ
Бабийчук Л. А., Землянских Н. Г.
Институт проблем криобилогии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Исследованы
особенности темперагурно-зависимых перестроек плазматических мембран,
прежде всего белков цитоскелета, модифицирующих устойчивость клеток
при криоконсервировании. Установлено, что обработка эритроцитов
криопротектором ПЭО-1500 при 0°С приводит к формированию более
прочной, чем в нативных клетках, фиксации группы белков цитоскелета,
что позволяет сохранить при криоконсервации структуру спектрин-актиновой
сети клеток близкой к нативной. В результате
эритроциты
приобретают повышенную устойчивость к последующему замораживанию-отогреву
по сравнению с клетками, обработанными криопротектором при 22°С.
Участие белков цитоскелета в температурно-осмотической стабилизации
клеток предполагает реализацию довольно сложного механизма, связанного
с дегидратацией клеток, перераспределением ионов, особенно ионов
кальция, а также активацией других систем вторичных мессенджеров
клетки. Исследование процессов фосфорилирования мембранных белков
в белых тенях, получаемых после обработки эритроцитов криопротектором
ПЭО-1500 в присутствии г-32Р-АТФ,
показало, что инкубация при 0°С сопровождается увеличением включения
32Р в спектрин в два раза по сравнению с нативными
эритроцитами, причем повышенный уровень фосфорилирования спектрина
сохраняется и после замораживания-отогрева эритроцитов, экспонированных
при 0°С с ПЭО-1500. Инкубация при комнатной температуре и последующее
замораживание-отогрев не вызывает подобного эффекта. Этот факт
отражает, по-видимому, особенности структурной модификации спектрина
в данных условиях, поскольку известно, что при 0°С энергетически
более выгодной становится олигомерная структура спектрина, а уровень
фосфорилирования олигомерных форм более, чем в 2 раза превышает
уровень фосфорилирования димеров и тетрамеров. Усиление ассоциативных
связей в спектрин-спектриновом взаимодействии, происходящее в
данных условиях, может приводить к повышению стабильности клеток
к действию замораживания-отогрева.