РОЛЬ ИЗОФОРМ АКТИНА В ЭВОЛЮЦИИ ФОКАЛЬНЫХ КОНТАКТОВ КЛЕТКА-МАТРИКС
Дугина В. Б., Васильев Ю. М.
НИИ физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского МГУ, Москва
Фокальный контакт (ФК)
у фибробластов имеет две известных стадии развития: 1) образование
начального (точечного) контакта; 2) его созревание в штриховой.
Новые данные позволили выделить следующую, 3-ю, стадию формирования
ФК - стабилизацию или "суперсозревание" фокального
контакта. Стабилизация ФК наблюдалась у миофибробластов в первичных
культурах крысиных фибробластов из различных органов и тканей,
а также была индуцирована воздействием TGFb на фибробласты в культуре.
Иммуноморфологическими методами изучалась роль изоформ актина
(в и
г - цитоплазматических
и б - гладкомышечного)
в образовании фокальных контактов различных стадий созревания.
Развитие 3-й стадии ФК всегда коррелирует с экспрессией б -
гладкомышечного
актина. Сканирующая конфокальная микроскопия с одновременным использованием
двух лазеров позволила выявить взаимную пространственную локализацию
белков фокальных контактов (винкулина, паксиллина), различных
изоформ актина, клеточного фибронектина, а также рецепторов к
фибронектину (интегрина в1)
у фибробластов и миофибробластов. Было проведено подробное сравнение
данных конфокальной микроскопии о пространственной структуре контактов
трех стадий созревания с использованием компьютерных программ
трехмерной реконструкции изображения. Пространственная реконструкция
позволяет предположить коническое строение суперзрелого краевого
фокального контакта, связанного с концом пучка микрофиламентов
и с фибриллами хорошо организованной сети клеточного фибронектина.
В экспериментах с ингибитором миозин-зависимой контрактильности
(BDM) была выявлена роль актин-миозиновых взаимодействий в стабилизации
фокального контакта.