РОЛЬ ИЗОФОРМ АКТИНА В ЭВОЛЮЦИИ ФОКАЛЬНЫХ КОНТАКТОВ КЛЕТКА-МАТРИКС

Дугина В. Б., Васильев Ю. М.
НИИ физико-химической биологии им. А. Н. Белозерского МГУ, Москва
Фокальный контакт (ФК) у фибробластов имеет две известных стадии развития: 1) образование начального (точечного) контакта; 2) его созревание в штриховой. Новые данные позволили выделить следующую, 3-ю, стадию формирования ФК - стабилизацию или "суперсозревание" фокального контакта. Стабилизация ФК наблюдалась у миофибробластов в первичных культурах крысиных фибробластов из различных органов и тканей, а также была индуцирована воздействием TGFb на фибробласты в культуре. Иммуноморфологическими методами изучалась роль изоформ актина (в и г - цитоплазматических и б - гладкомышечного) в образовании фокальных контактов различных стадий созревания. Развитие 3-й стадии ФК всегда коррелирует с экспрессией б - гладкомышечного актина. Сканирующая конфокальная микроскопия с одновременным использованием двух лазеров позволила выявить взаимную пространственную локализацию белков фокальных контактов (винкулина, паксиллина), различных изоформ актина, клеточного фибронектина, а также рецепторов к фибронектину (интегрина в1) у фибробластов и миофибробластов. Было проведено подробное сравнение данных конфокальной микроскопии о пространственной структуре контактов трех стадий созревания с использованием компьютерных программ трехмерной реконструкции изображения. Пространственная реконструкция позволяет предположить коническое строение суперзрелого краевого фокального контакта, связанного с концом пучка микрофиламентов и с фибриллами хорошо организованной сети клеточного фибронектина. В экспериментах с ингибитором миозин-зависимой контрактильности (BDM) была выявлена роль актин-миозиновых взаимодействий в стабилизации фокального контакта.