ГЕТЕРОГЕННЫЙ ПРОЦЕСС СВОРАЧИВАНИЯ ЛИЗОЦИМА ЛОШАДИ (ВЗАИМОСВЯЗЬ РАВНОВЕСНЫХ И КИНЕТИЧЕСКИХ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ СОСТОЯНИЙ)
Морозова-Рош Л. А., Джонс Джонатан, Добсон Кристофер
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино; *Оксфордский Университет, Оксфорд, Англия
Сворачивание лизоцима
лошади из раствора гуанидингидрохлорида изучалось с использованием
методов водородного обмена быстрого мечения в сочетании с ЯМР
и оптических методов остановленной струи. Оптические кинетические
эксперименты продемонстрировали, что обширный гидрофобный коллапс
происходит в белке очень быстро после начала процесса сворачивания.
В экспериментах с быстрым водородным мечением отслеживалась кинетика
водородного обмена свыше 50 индивидуальных центров, распределенных
в различных участках молекулярной структуры, что обеспечило очень
детальную картину формирования нативной структуры белка. Показано,
что промежуточное состояние, имеющее стабильную структуру, включающую
три из четырех главных a-спиралей в a-домене, сформировалось во
всех молекулах белка в течение 4 мс. Это состояние очень близко
по своим структурным свойствам к расплавленной глобуле, наблюдаемой
при кислых pН.