ГЕТЕРОГЕННЫЙ ПРОЦЕСС СВОРАЧИВАНИЯ ЛИЗОЦИМА ЛОШАДИ (ВЗАИМОСВЯЗЬ РАВНОВЕСНЫХ И КИНЕТИЧЕСКИХ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ СОСТОЯНИЙ)

Морозова-Рош Л. А., Джонс Джонатан, Добсон Кристофер
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино; *Оксфордский Университет, Оксфорд, Англия
Сворачивание лизоцима лошади из раствора гуанидингидрохлорида изучалось с использованием методов водородного обмена быстрого мечения в сочетании с ЯМР и оптических методов остановленной струи. Оптические кинетические эксперименты продемонстрировали, что обширный гидрофобный коллапс происходит в белке очень быстро после начала процесса сворачивания. В экспериментах с быстрым водородным мечением отслеживалась кинетика водородного обмена свыше 50 индивидуальных центров, распределенных в различных участках молекулярной структуры, что обеспечило очень детальную картину формирования нативной структуры белка. Показано, что промежуточное состояние, имеющее стабильную структуру, включающую три из четырех главных a-спиралей в a-домене, сформировалось во всех молекулах белка в течение 4 мс. Это состояние очень близко по своим структурным свойствам к расплавленной глобуле, наблюдаемой при кислых pН.