АНАЛИЗ САМОСБОРКИ МОЛЕКУЛ КОЛЛАГЕНА ТИПА I В ФИБРИЛЛЫ
Николаева Т. И., Писаченко А. И., Рочев Ю. А., Гаврилюк Б. К.
Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, 142292 Пущино Московской обл.
Показано, что самосборка
молекул коллагена типа I в
фибриллы зависит от ряда факторов: температуры,
концентрации коллагена и наличия телопептидов.
Переход молекул коллагена из уксуснокислого раствора в нейтральный
буферный раствор (0,02
М Na2HPO4, 0,15 M NaCl,
pH 7,2) и термостатирование
образцов коллагена в течение одного часа оцениваются методами
спектрофотометрии и сканирующей микрокалориметрии. Была проверена
зависимость самосборки молекул коллагена от температур, обычно
используемых для изучения фибриллогенеза коллагена: 25, 30, 350C.
Полученные данные
по изменению оптической плотности растворов коллагена показывают
снижение времени для самосборки при увеличении температуры,
повышении концентрации и наличии телопептидов.
Форма сигмоидных кривых различается и отражает сложный механизм
самосборки молекул коллагена типа I в
разных условиях. Микрокалориметрические
кривые и термодинамические параметры перехода молекул из свободного
сотояния в упорядоченное позволяют четко показать влияние температуры
ниже и выше 300С для
коллагена с телопептидами.
При изменении температуры от 30 до 35оС реорганизация
молекул коллагена сопровождается снижением температуры денатурации
(Тд),
полуширины перехода из нативного состояния в денатурированное
(DТ),
энтальпии перехода (DН), энтропии перехода (DS)
и возрастанием
степени упорядоченности коллагеновых фибрилл.