ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ТРОМБОЦИТОВ И ИХ ИЗМЕНЕНИЕ ПРИ КОВАЛЕНТНОЙ МОДИФИКАЦИИ МЕМБРАН
Рощупкин Д. И.
Российский государственный медицинский университет МЗ РФ, 117869 Москва
Рассеяние света тромбоцитами
под малыми углами усиливается при образовании их микроагрегатов,
включающих до нескольких десятков клеток. Светопропускание тромбоцитарных
суспензий при сборе прошедшего света в пределах очень малого телесного
угла падает как результат перехода клеток в округлое состояние,
так и за счет формирования микроагрегатов. Разработан приоритетный
кинетический нефелометрический способ исследования мелких агрегатов
(начальной агрегации), позволяющий изучать ослабленную агрегационную
активность тромбоцитов, в том числе при действии агонистов в низких
концентрациях. Разработана комплексная система анализа физико-химических
свойств и функций тромбоцитов. Она включает нефелометрический
способ анализа концентрации тромбоцитов (в том числе в составе
микроагрегатов) и начальной агрегации, флуориметрический метод
исследования состояния внутриклеточных гранул на основе использования
флуоресцентных зондов, нефелометрический метод исследования адгезивной
способности клеток, турбидиметрические способы анализа вторичной
агрегации и трансформации формы клеток. Современные биомедицинские
технологии предусматривают использование способов направленной
модуляции активности клеток крови при патологических состояниях.
Один из подходов для осуществления этой модуляции заключается
в ковалентной модификации белков и липидов плазматической мембраны.
Для ковалентной модификации тромбоцитов и лейкоцитов использованы
гипохлорит и хлораминовые производные биогенных соединений, образующиеся
в реакции, катализируемой миелопероксидазой фагоцитов, а также
ультрафиолетовое излучение. Образование микроагрегатов изолированных
тромбоцитов, стимулированное ионами кальция и регистрируемое по
интенсивности рассеянного под малыми углами света, эффективно
ингибируется гипохлоритом. Это, вероятно, связано с модификацией
тиольных химических групп кальциевых каналов. В цельной крови
биогенные хлорамины модифицируют тромбоциты с высокой избирательностью.
В условиях сильного подавления их активности повреждение эритроцитов
по критерию гемолиза не происходит. В обогащенной тромбоцитами
плазме ингибирование (образование крупных агрегатов тромбоцитов
хлораминовыми производными аминокислот зависит от их молекулярной
массы) возрастает в несколько раз в ряду от N-хлорлейцина до
N-хлорглицина. Это обусловлено особой реакцией хлораминов, имеющих
меньшую молекулярную массу, с серосодержащими группами в углублениях
молекул белков и мембраны. Выявлены основные физико-химические
свойства, определяющие стабильность биогенных хлораминов. Среди
них наиболее стабилен в растворенном и твердом состояниях N,N-дихлортаурин.
Имеется перспектива разработки на основе биогенных хлораминов
средства для борьбы с тромбозами, опосредованными тромбоцитами.