ВКЛАД АДГЕЗИИ НА СТЕКЛО В ЛЮМИНОЛЗАВИСИМУЮ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЮ ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ, СТИМУЛИРОВАННУЮ ДОБАВЛЕНИЕМ СУЛЬФАТА БАРИЯ

Пирязев А. П., Владимиров Ю. А., Шерстнев М. П.
Научно-исследовательский институт физико-химической медицины МЗ РФ, 119828 Москва
При добавлении сульфата бария (СБ) к цельной крови человека или животных в присутствии люминола возникает вспышка хемилюминесценции (ХЛ). Способные к фагоцитозу клетки крови поглощают кристаллы сульфата бария и оседают на дно кюветы, что сопровождается развитием вспышки люминолзависимой ХЛ. При проведении световой микроскопии было установлено, что кристаллы СБ адгезируют на поверхности лейкоцитов и вместе с ними оседают на дно кюветы. Размеры кристаллов примерно в 10 раз меньше размеров лейкоцитов. При электронно-микроскопическом исследовании были обнаружены агрегаты кристаллов СБ неправильной формы в виде болюсов с размерами от 50 нм до 1,5 мкм. С размерами менее 50 нм и более 1,5 мкм агрегаты не встречались. Отношение длины болюса к его поперечному размеру для небольших агрегатов величиной до 750 нм составляло 1, а для крупных кристаллов величиной до 1,5 мкм -доходило до 5. При подсчете размеров агрегатов кристаллов по данным двух электронограмм 60% агрегатов кристаллов были представлены с размерами от 50 до 200 нм. Агрегаты с размерами от 50 до 350 нм составляли 76% всех кристаллов. Таким образом, основная масса кристаллов представлена довольно однородной популяцией с размерами от 50 до 200 нм. Как показали электронно-микроскопические исследования, кристаллы СБ поглощаются клетками с развитием дегрануляции в течение 10 мин и более. При взаимодействии кристаллов СБ с клетками вначале происходит их адгезия к лейкоцитам и последующее поглощение лейкоцитами отдельных кристаллов и агрегатов кристаллов. Следовательно, развитие ХЛ связано, по-видимому, с фагоцитозом кристаллов СБ. Однако неизвестно, возникает ли ХЛ только при фагоцитозе кристаллов или осевшие на дно кюветы клетки способны адгезировать на поверхность стекла, внося дополнительный вклад в регистрируемое свечение. Для выяснения этого вопроса было проведено измерение ХЛ в обычных кварцевых кюветах (п=5) и в кюветах, обработанных силиконом, для предотвращения адгезии фагоцитов на стекло (п=5). Оказалось, что в обычных кюветах амплитуда вспышки ХЛ цельной крови человека составила (3,66+0,09)·106 квант/с·4р и кроликов - (2,12+0,12)·106 квант/с·4 р. В силиконированных кюветах значения амплитуды вспышки ХЛ составили (3,65+0,09)·106 и (1,43+0,17)·10квант/с·4р соответственно. Видно, что после обработки кюветы силиконом, амплитуда вспышки ХЛ крови человека практически не изменилась, а у кролика снизилась в среднем на 33 %. Таким образом, механизм возникновения стимулированной сульфатом бария люминолзависнмой ХЛ цельной крови человека и кролика имеет отличия. Так, ХЛ цельной крови человека полностью определяется поглощением фагоцитами кристаллов сульфата бария. В то время как в ХЛ цельной крови кролика некоторый вклад вносит адгезия клеток на стекло.