АГРЕГАЦИЯ ФИБРИНОГЕНА В РАСТВОРЕ В ПРИСУТСТВИИ КАТАЛИТИЧЕСКИХ КОЛИЧЕСТВ МОНОМЕРНОГО ФИБРИНА
Гершкович К. Б., Розенфельд М. А.
Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля, 117977 Москва
В настоящей работе методом
рэлеевского светорассеяния в широком диапазоне углов рассеяния
исследовали агрегацию фибриногена (Fg) при
различных молярных соотношениях Fg: fm
(250:1 - 10000:1).
Показано, что в условиях, близких к физиологическим (0,065 фосфатный
буфер, рН 7,2, [Fg]=2мг/мл)
и соотношении Fg: fm
равном 500:1,
fm
сокращает латентный период, предшествующий лавинообразному нарастанию
интенсивности светорассеяния и, таким образом, ускоряет реакцию.
Наблюдаемый эффект возрастает по мере уменьшения соотношения Fg:
fm
; при
Fg: fm
равном
10000:1,
влияние fm
на скорость
реакции не обнаружено. В контрольных экспериментах с хромогенным
субстратом S-2251,
даже при Fg: fm
равном 250:1,
активность тромбина не выявлена. Полученный результат согласуется
с предложенной нами ранее концепцией о возможности спонтанного
(неферментативного) перехода нативной конформации в активированное
состояние, сопровождающееся демаскированнием дополнительных реакционных
групп в доменах D.
На основании совокупности результатов настоящей и предыдущих работ
сделан вывод о том, что fm,
обладая, по крайней мере, восемью центрами полимеризации, способствует
концентрированию и накоплению активированных молекул Fg*.
При этом эффективность fm
значительно превосходит таковую фрагментов E
и
D, что соответствует
экспериментальным данным и теоретическим предпосылкам.
Обсуждается возможность fm
являться
природным катализатором формирования фибриногеновых кластеров
в присутствии других белковых и небелковых компонентов плазмы
крови.