ОБНАРУЖЕНИЕ ВАРИАБЕЛЬНОСТИ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОГО ТОПОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ДНК В ЛЕЙКОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА КАК АДАПТАЦИОННОЙ РЕАКЦИИ ОРГАНИЗМА К УСЛОВИЯМ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ
Папонов В. Д., Сигора Г. А.
Медико-генетический научный центр РАМН, 115478 Москва
Исследовали лейкоциты
периферической крови человека в условиях, вызывающих депротеинизацию
хромосомной ДНК и стабильное поддержание ее в виде кольцеобразных
суперспирализованных петель нуклеоидов. Стабильное состояние ДНК
в нуклеоидах обеспечивалось присутствием 200-кратного избытка
гепарина по отношению к ДНК в забуференном растворе физиологической
ионной силы (рН 6,0). Измерение вязкости дисперсии нуклеоидов
лейкоцитов в процессе титрования ДНК бромидом этидия (EtBr)
на ротационном вискозиметре позволило получить кривые титрования
с 5-8 максимумами в пределах концентрации EtBr
от 0 до 6 мкг/мл при шаге титрования 0,25 мкг/мл EtBr.
Последовательное выделение лейкоцитов из замороженных объемов
крови донора позволяет получать кривые титрования нуклеоидов с
воспроизводимой локализацией максимумов вязкости. Однако при повторных
заборах крови у конкретного донора локализация некоторых максимумов
меняется, что можно связать с адаптационной реакцией организма
к условиям среды обитания человека. Показано, что изменение степени
суперспирализации некоторых семейств петель суперспирализованной
ДНК лейкоцитов может происходить либо за счет топоизомеразной
активности в отдельных клетках, либо за счет изменения популяционного
состава лейкоцитов периферической крови, отличающихся друг от
друга характером суперспирализации разных семейств кольцеобразных
семейств ДНК.