СНИЖЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ РЯДА МЕТАЛЛОПРОТЕИНОВ ПОСЛЕ ГИПЕРТЕРМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ КАК ОДИН ИЗ МЕХАНИЗМОВ ФОРМИРОВАНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ КЛЕТОК К ОКИСЛИТЕЛЬНОМУ ПОВРЕЖДЕНИЮ
Романова Т. А.
Красноярский государственный университет, Красноярск
Температурный фактор представляет
собой классическую модель индукции в клетках синтеза особого класса
белков - белков теплового шока (heat shock proteins, hsp)
массой 70 кД. Они обеспечивают рефолдинг клеточных белков, конформация
которых была нарушена при температурном воздействии или под влиянием
иных стрессовых факторов. Синтез и функционирование hsp 70 являются
АТФ-зависимыми процессами. В работе изучали интенсивность энергетического
обмена гепатоцитов крыс в условиях перфузии печени in situ спустя
24 часа после гипертермического воздействия in vivo (+41,0 С,
25 мин). Продолжительность перфузии составляла 60 мин, с 30 по
40 мин с входящим перфузатом в печень подавали раствор фруктозы
в конечной концентрации 10мМ. Наблюдали выраженные изменения редокс-потенциала
клеток, свидетельствующие о модуляции реакций окислительного фосфорилирования.
В динамике перфузии органа прогрессирующее снижение скорости выделения
глюкозы в перфузат (р<0,02) сочеталось с достаточно высоким
отношением NADH/NAD (лактат/пируват) (р<0,02). При этом скорость
потребления О2 была стабильно низкой (р<0,01) в
течение всей перфузии, включая и период функциональной нагрузки
фруктозой. Эти результаты вполне согласуются предположением (Polla
et al., 1996) о том, что митохондрии являются селективной мишенью
опосредованной тепловым шоком защиты клеток от последующего окислительного
повреждения. Примененный нами, в качестве модулятора окислительного
стресса в клетках, акриламид, не оказывал выраженного повреждающего
эффекта при его поступлении в организм экспериментальных животных
спустя 24 часа после гипертермического воздействия. В то же время,
его изолированное применение, помимо значительного снижения интенсивности
процессов гликолиза, характеризовалось высокой скоростью поступления
в перфузат малонового диальдегида - продукта перекисного окисления
липидов клеточных мембран. Согласно параметрам гексеналового теста,
отражающего активность цитохром Р-450-зависимой системы биотрансформации
ксенобиотиков в гепатоцитах, гипертермическое воздействие приводит
к "отмене" эффекта предварительной индукции этой ферментной
системы. Установлено (Hirvonen et al., 1996), что повышение уровня
hsp 70 связано с накоплением в клетках оксида азота NО, который,
в свою очередь, способен связываться с металлопротеинами (цитохромом
с, гемоглобином, цитохромом Р-450) и заметно снижать их активность
(Bates et al., 1996; Henry et al., 1995). Ингибирование белкового
синтеза посредством циклогексимида нивелировало эффект "отмены"
индукции цитохрома Р-450 при гипертермическом воздействии на организм
животных.