СНИЖЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ РЯДА МЕТАЛЛОПРОТЕИНОВ ПОСЛЕ ГИПЕРТЕРМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ КАК ОДИН ИЗ МЕХАНИЗМОВ ФОРМИРОВАНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ КЛЕТОК К ОКИСЛИТЕЛЬНОМУ ПОВРЕЖДЕНИЮ

Романова Т. А.
Красноярский государственный университет, Красноярск
Температурный фактор представляет собой классическую модель индукции в клетках синтеза особого класса белков - белков теплового шока (heat shock proteins, hsp) массой 70 кД. Они обеспечивают рефолдинг клеточных белков, конформация которых была нарушена при температурном воздействии или под влиянием иных стрессовых факторов. Синтез и функционирование hsp 70 являются АТФ-зависимыми процессами. В работе изучали интенсивность энергетического обмена гепатоцитов крыс в условиях перфузии печени in situ спустя 24 часа после гипертермического воздействия in vivo (+41,0 С, 25 мин). Продолжительность перфузии составляла 60 мин, с 30 по 40 мин с входящим перфузатом в печень подавали раствор фруктозы в конечной концентрации 10мМ. Наблюдали выраженные изменения редокс-потенциала клеток, свидетельствующие о модуляции реакций окислительного фосфорилирования. В динамике перфузии органа прогрессирующее снижение скорости выделения глюкозы в перфузат (р<0,02) сочеталось с достаточно высоким отношением NADH/NAD (лактат/пируват) (р<0,02). При этом скорость потребления О2 была стабильно низкой (р<0,01) в течение всей перфузии, включая и период функциональной нагрузки фруктозой. Эти результаты вполне согласуются предположением (Polla et al., 1996) о том, что митохондрии являются селективной мишенью опосредованной тепловым шоком защиты клеток от последующего окислительного повреждения. Примененный нами, в качестве модулятора окислительного стресса в клетках, акриламид, не оказывал выраженного повреждающего эффекта при его поступлении в организм экспериментальных животных спустя 24 часа после гипертермического воздействия. В то же время, его изолированное применение, помимо значительного снижения интенсивности процессов гликолиза, характеризовалось высокой скоростью поступления в перфузат малонового диальдегида - продукта перекисного окисления липидов клеточных мембран. Согласно параметрам гексеналового теста, отражающего активность цитохром Р-450-зависимой системы биотрансформации ксенобиотиков в гепатоцитах, гипертермическое воздействие приводит к "отмене" эффекта предварительной индукции этой ферментной системы. Установлено (Hirvonen et al., 1996), что повышение уровня hsp 70 связано с накоплением в клетках оксида азота NО, который, в свою очередь, способен связываться с металлопротеинами (цитохромом с, гемоглобином, цитохромом Р-450) и заметно снижать их активность (Bates et al., 1996; Henry et al., 1995). Ингибирование белкового синтеза посредством циклогексимида нивелировало эффект "отмены" индукции цитохрома Р-450 при гипертермическом воздействии на организм животных.