МОЛЕКУЛА HOD И МЕМБРАННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ КЛЕТОК КРОВИ

Зацепина Г. Н., Тульский Т. В., Венгрус Т. В., Тарнопольская О. В.
Физический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, 119899 Москва
Известно, что D2O и Н2О характеризуют разные константы диссоциациации протона и дейтона, которые в свою очередь существенны в реакциях ферментативного гидролиза молекул воды. В данной работе была исследована взаимосвязь изменений внутриклеточного рН и мембранного потенциала клеток в разных физиологических состояниях организма млекопитающего в водных средах с разным изотопным составом. В качестве рН зависимого зонда мы использовали зонд BCECF. Этот зонд имеет четыре карбоксильные группы. При попадании в клетку он переходит в заряженную форму и при замещении одной из карбоксильных групп на внутриклеточный протон флуоресцирует. Интенсивность флуоресценции этого зонда обратно пропорциональна внутриклеточному рН в обычной воде - Н2О. В воде с 1% D2O в Н2О, 0.3 процентной D2O и в чистой D2O обнаружены три разные экспоненциальные зависимости интенсивности флуоресценции зонда от внутриклеточного рН в интервале значений рН 6.8 - 7.5, что свидетельствует о том, что одному значению интенсивности флуоресценции зонда BCECF в указанном выше интервале изменений рН соответствуют три разных значения рН. При этом в тяжелой воде значения рН сдвигаются относительно воды Н2О на 0.3 единицы рН в щелочную область, а в воде Н2О с 2% молекул HOD в кислую область, примерно на то же значение рН.