МОЛЕКУЛА HOD И МЕМБРАННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ КЛЕТОК КРОВИ
Зацепина Г. Н., Тульский Т. В., Венгрус Т. В., Тарнопольская О. В.
Физический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова, 119899 Москва
Известно, что
D2O и
Н2О
характеризуют разные константы диссоциациации протона и дейтона,
которые в свою очередь существенны в реакциях ферментативного
гидролиза молекул воды. В данной работе была исследована взаимосвязь
изменений внутриклеточного рН и мембранного потенциала клеток
в разных физиологических состояниях организма млекопитающего в
водных средах с разным изотопным составом. В качестве рН зависимого
зонда мы использовали зонд BCECF.
Этот зонд имеет четыре карбоксильные группы. При попадании в клетку
он переходит в заряженную форму и при замещении одной из карбоксильных
групп на внутриклеточный протон флуоресцирует. Интенсивность флуоресценции
этого зонда обратно пропорциональна
внутриклеточному рН в обычной воде - Н2О. В воде с
1% D2O в
Н2О, 0.3 процентной D2O
и в чистой
D2O обнаружены
три разные экспоненциальные зависимости интенсивности флуоресценции
зонда от внутриклеточного рН в интервале значений рН 6.8 -
7.5, что свидетельствует о том, что одному значению интенсивности
флуоресценции зонда BCECF
в указанном выше интервале изменений рН соответствуют три разных
значения рН. При этом в тяжелой воде значения рН сдвигаются относительно
воды Н2О на 0.3 единицы рН в щелочную область, а в
воде Н2О с 2% молекул HOD
в кислую область, примерно на то же значение рН.