ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ АНТИФРИЗНЫХ ГЛИКОПРОТЕИНОВ С БИСЛОЙНЫМИ ЛИПИДНЫМИ МЕМБРАНАМИ
Каранова М. В., Григорьев П. А., Межевикина Л. М.
Институт биофизики клетки РАН, 142292 Пущино
Задача настоящей работы
заключалась в том, чтобы выяснить в принципе возможность взаимодействия
антифризных гликопротеинов (АФГП) с бислойными липидными мембранами
(БЛМ) и получить элементарные характеристики этого взаимодействия.
Для формирования БЛМ использовали фосфатидилхолин из соевых бобов
фирмы "Sigma"
(США) в концентрации 20 мг/мл
в n-гептане. Водный электролит, омывающий с обеих сторон
мембрану, содержал 40 мМ KCI,
рН 6,5. Амплитуда переменного мембранного тока на частоте второй
гармоники (f
= 1040 Гц) приложенного переменного напряжения частотой
f = 20 Гц
измерялась селективным нановольтметром тип 237. Выходной сигнал
селективного нановольтметра выводился на двухкоординатный самописец
на вход "Y",
на вход "X" которого подавалось пилообразное напряжение
частотой 0,1 Гц. Вид кривой зависимости амплитуды второй гармоники
от величины постоянного пилообразного напряжения, подаваемого
на мембрану, имел форму параболы. По смещению минимума этой параболы
оценивали величину изменения разности поверхностных потенциалов
бислоя под воздействием АФГП, добавленных с одной стороны мембраны.
Показано, что АФГП а интервале концентраций 2-20 мг/мл,
изменяют смещение этого минимума, повышая величину разности поверхностных
потенциалов бислоя от 2,3 до 30 mV.
Такое изменение потенциалов под воздействием АФГП, молекулы
которых заряжены положительно, может свидетельствовать об их возможной
сорбции на бислойной мембране. Таким образом, эти результаты позволяют
предположить, что АФГП, в принципе, могут сорбироваться и на клеточной
мембране, оказывая на нее стабилизирующее воздействие путем уменьшения
выхода из клетки одно- и двухвалентных катионов.