МОЛЕКУ Л ЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ВЕЗИКУЛЯРНОГО ТРАНСПОРТА

Мажуль И., Дуден Р., Штрауб М., Хелл С., Зелинг Х.-Д.
Институт биофизической химии Макса Планка, Гёттинген, Германия; *Лаборатория клеточной био л огии, Кембриджский университет, Британия
Сложная организация эукариотических клеток требует налаженных механизмов внутриклеточного везикулярного транспорта. Новейшие исследования показали, что механизмы, лежащие в основе таких функционально важных процессов как эндо- и экзоцитоз уникальны и, сохранившись в процессе эволюции, эффективно действуют как в клетке дрожжей, так и в нейроне гиппокампа. Как эндоцитоз лиганд-рецепторного комплекса с поверхности плазматической мембраны, так и транспорт вновь синтезируемых секреторных белков из эндоплазматического ретикулума через цис-, медиал-, транс- Гольджи к поверхности плазматической мембраны осуществляются в везикулах. Транспортные везикулы формируются и отпочковываются от донорной мембраны и после осуществления раунда внутриклеточного транспорта сливаются с акцепторной мембраной. Специализированные белки цитоплазмы покрывают вновь образованные везикулы. Согласно современным представлениям, формирование транспортной везикулы на мембране внутриклеточного компартмента начинается после взаимодействия белков, переносимых везикулой, с трансмембранным рецептором. Изменение структурного состояния связанного рецептора может распознаваться цитоплазматическими белками, которые ассоциируются с мембраной и инициируют образование транспортной везикулы. Здесь мы использовали флюоресцентный резонансный перенос энергии (ФРПЭ) как метод регистрации белок-белковых взаимодействий, образования межмолекулярных комплексов и оценки расстояния между молекулами на транспортной везикуле с применением двухфотонного возбуждения хромофоров - рекомбинантных белков транспортных везикул и спектральных мутантов зеленого флюоресцирующего белка, образующих донорно-акцепторные пары в живой клетке и позволяющих производить во времени регистрацию процессов, индуцированных транспотом токсина в различных внутриклеточных компартментах. Результаты этих исследований будут представлены в данной работе.