ГИПЕРРЕКОМБИНАЦИЯ ДНК ХАРАКТЕРНА ДЛЯ БАКТЕРИЙ С ПОВЫШЕННЫМ УРОВНЕМ РЕПАРАЦИИ
Манухов И. В., Завильгельский Г. Б.
Государственный научный центр Российской Федерации "ГНИИГЕНЕТИКА", Москва 113545
Нами разработана кинетическая
биолюминесцентная система на основе гибридной плазмиды pF8
с генами luxAB,
кодирующими (ab)
- субъединицы люциферазы
Vibrio fischeri.
После трансформации
бактерий в процеccе
деления клетки в результате внутримолекулярной рекомбинации в
плазмиде pF8 восстанавливается
нативный ген luxA
и синтезируется
активная люцифераза, что фиксируется по свечению суспензии. Т.к.
интенсивность биолюминесценции пропорциональна количеству рекомбинированных
молекул ДНК pF8, то
можно связать простой формулой частоту рекомбинаций (Wn),
числом делений (n) c
момента трансформации и
определить величину a -
вероятность кросса
на единицу длины ДНК в расчете на одно деление.
Измерены значения
a в
штаммах E.coli,
характеризующихся повышенной резистентностью к ДНК-тропным агентам
(g- и
UV-облучение, ПУФА-фотосенсибилизация).
Показано значительное усиление рекомбинационной активности (гиперрекомбинация)
у этих штаммов. Обнаружена ключевая роль геликазы II
(UvrD) в SOS-индуцированной
гиперрекомбинации. Предложена модель усиления рекомбинационных
процессов в клетке.