ГИПЕРРЕКОМБИНАЦИЯ ДНК ХАРАКТЕРНА ДЛЯ БАКТЕРИЙ С ПОВЫШЕННЫМ УРОВНЕМ РЕПАРАЦИИ

Манухов И. В., Завильгельский Г. Б.
Государственный научный центр Российской Федерации "ГНИИГЕНЕТИКА", Москва 113545
Нами разработана кинетическая биолюминесцентная система на основе гибридной плазмиды pF8 с генами luxAB, кодирующими (ab) - субъединицы люциферазы Vibrio fischeri. После трансформации бактерий в процеccе деления клетки в результате внутримолекулярной рекомбинации в плазмиде pF8 восстанавливается нативный ген luxA и синтезируется активная люцифераза, что фиксируется по свечению суспензии. Т.к. интенсивность биолюминесценции пропорциональна количеству рекомбинированных молекул ДНК pF8, то можно связать простой формулой частоту рекомбинаций (Wn), числом делений (n) c момента трансформации и определить величину a - вероятность кросса на единицу длины ДНК в расчете на одно деление. Измерены значения a в штаммах E.coli, характеризующихся повышенной резистентностью к ДНК-тропным агентам (g- и UV-облучение, ПУФА-фотосенсибилизация). Показано значительное усиление рекомбинационной активности (гиперрекомбинация) у этих штаммов. Обнаружена ключевая роль геликазы II (UvrD) в SOS-индуцированной гиперрекомбинации. Предложена модель усиления рекомбинационных процессов в клетке.