ЭПР-ОКСИМЕТРИЯ ХЛОРОПЛАСТОВ И ЛИСТЬЕВ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ
Лигеза A., Вишневска А., Хайд Д. С., Субчински B. K., Тихонов А. Н.
Инcтитyт молекулярной биологии, Ягеллонский университет, Краков, Польша; *Институт биофизики, Висконсинский медицинский колледж, Милуоки, США; **Физический факультет МГУ им.М.В-Ломоносова, Москва, Россия
С помощью чувствительных
к кислороду парамагнитных зондов изучена роль кислорода в качестве
акцептора электрона в хлоропластах, измерены проницаемость молекулярного
кислорода через тилакоидные мембраны, а также его диффузия внутри
зеленого листа. Производство и потребление кислорода непосредственно
внутри листа измеряли с помощью кислородных зондов двух типов:
1) нитроксильных радикалов, заключенных внутри парафиновых везикул
[I], и 2) частиц угля [2]. Зарегистрировано увеличение концентрации
кислорода внутри листа при освещении и убыль кислорода в темноте
за счет процессов дыхания. Эти процессы, однако, наблюдаются лишь
том случае, когда поверхность листа изолирована от атмосферы слоем
воды. В нормальных физиологических условиях (лист находится в
атмосфере) никаких видимых изменений концентрации кислорода внутри
листа не происходит. По уширению кислородом спектров ЭПР липидорастворимых
спиновых меток (5-, 9-, 12- и 16-доксилстеарат) измерен трансмебранный
профиль произведения коэффициента диффузии кислорода на его локальную
концентрацию, D(x)C(x).
На основании этого профиля вычислен коэффициент проницаемости
тилакоидной мембраны для кислорода, который составляет величину
Рm = 39 см/с (при 20°С). Оценки показывают,
что при данном значении Рm, трансмембранная
разность концентраций кислорода в тилакоидах в стационарном состоянии
(при освещении хлоропластов насыщающим светом) не превышает величины
QС = 1 мкМ. Таким образом, за счет высокой проницаемости тилакоидных
мембран для кислорода и хорошей вентиляции внутрилистовых полостей
концентрация кислорода внутри листа поддерживается на атмосферном
уровне, что предотвращает кислородную интоксикацию и обеспечивает
нормальную работу листьев высших растений. Работа выполнена при
частичной поддержке РФФИ (грант 97-04-49554),
NM U.S.A. (гранты
GM22923
и RRO
1008), и гранта Ягеллонского университета.