Р 2Х -ПУРИНОРЕЦЕПТОРЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С НИКОТИНОВЫМИ ХОЛИНОРЕЦЕПТОРАМИ В НЕЙРОНАХ ПОДСЛИЗИСТОГО СПЛЕТЕНИЯ МОРСКОЙ СВИНКИ

Глушаков А. В., Гушакова Е. Ю., Скок В. И.
Институт физиологии им. А.А. Богомольца НАН Украины, 252024 Киев, Украина
Эффекты экзогенного АТФ и ацетилхолина (АХ) на диссоциированные нейроны подслизистого сплетения тонкого кишечника морской свинки были исследованы при помощи метода фиксации потенциала пэтч-клэмп в конфигурации "целая клетка". При мембранном потенциале -50 мВ аппликации АТФ (50-1000 мкМоль) и АХ (50-200 мкМоль) под давлением (или ионофоретические аппликации данных веществ) вызывали в большинстве нейронов быстрые входящие трансмембранные токи (соответственно IАТФ и IАХ) вследствие активации соответственно Р-пуринорецепторов и никотиновых холинорецепторов (НХР). Кроме того, в некоторых нейронах наблюдались медленные выходящие К+-токи, вызванные, по-видимому, активацией соответственно связанных с G-белками Р-пуринорецепторов и мускариновых холинорецепторов. 90% нейронов, чувствительных к АТФ, содержали Р-пуринорецепторы, которые характеризовались медленной десенситизацией. При аппликациях АТФ одновременно с АХ во всех исследованных нейронах наблюдалась генерация токов (IАТФ+АХ), амплитуда которых не была равна сумме контрольных значений IАТФ и IAX. В большинстве случаев амплитуда IАТФ+АХ не превышала амплитуды большего тока- IАТФ или IАХ, то есть наблюдалась взаимная окклюзия IАТФ и I.АХ. Данный эффект наблюдался как в присутствии, так и в отсутствие во внутриклеточном растворе ГТФ (или ГТФ-г-S, 0.2 мМ) и АТФ (2 мМ). Окклюзия наблюдалась и в случае IАТФ и токов, вызванных аппликациями никотина (150-300 мкМ). В то же время IАТФ и быстрые входящие токи, вызванные ионофоретическими аппликациями 5-гидрокситриптамина вследствие активации серотониновых рецепторов, возможно, 5НТ3-типа, были аддитивными. Не наблюдалось взаимной окклюзии в случае IАТФ и медленных АТФ- и АХ-индуцированных К+-токов. Аппликации через перфузирующий раствор аналогов АТФ: в,г-имидо-АТФ, б,в-метилен-АТФ и в,г-метилен-АТФ в концентрациях 100 мкМ, а также активатора P1-пуринорецепторов аденозина (100-300 мкМ) не вызывали ионных токов и не оказывали влияния на IАХ. Блокатор Р2Y-пуринорецепторов реактив синий 2 (30 мкМ) не устранял эффекта окклюзии. Блокаторы НХР триметафан (30 мкМ), гексаметоний (50 мкМ) и d-тубокурарин (40 мкМ) не оказывали влияния на IАТФ, но в тоже время полностью блокировали IАХ как в присутствии, так и в отсутствие АТФ. Представленные результаты позволяют предположить, что нейроны подслизистого сплетения экспрессируют два различных подтипа ионотропных Р-пуринорецепторов. б,в-Метилен-АТФ-нечувствительные Р-пуринорецепторы с медленной десенситизацией и НХР не являются функционально независимыми, возможно, в результате существования прямой связи между этими рецепторами.