Р 2Х -ПУРИНОРЕЦЕПТОРЫ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ С НИКОТИНОВЫМИ ХОЛИНОРЕЦЕПТОРАМИ В НЕЙРОНАХ ПОДСЛИЗИСТОГО СПЛЕТЕНИЯ МОРСКОЙ СВИНКИ
Глушаков А. В., Гушакова Е. Ю., Скок В. И.
Институт физиологии им. А.А. Богомольца НАН Украины, 252024 Киев, Украина
Эффекты экзогенного АТФ
и ацетилхолина (АХ) на диссоциированные нейроны подслизистого
сплетения тонкого кишечника морской свинки были исследованы при
помощи метода фиксации потенциала пэтч-клэмп в конфигурации "целая
клетка". При мембранном потенциале -50 мВ аппликации
АТФ (50-1000 мкМоль) и АХ (50-200 мкМоль) под давлением (или ионофоретические
аппликации данных веществ) вызывали в большинстве нейронов быстрые
входящие трансмембранные токи (соответственно IАТФ
и IАХ)
вследствие активации соответственно Р2Х-пуринорецепторов
и никотиновых холинорецепторов (НХР). Кроме того, в некоторых
нейронах наблюдались медленные выходящие К+-токи, вызванные,
по-видимому, активацией соответственно связанных с G-белками Р2У-пуринорецепторов
и мускариновых холинорецепторов. 90% нейронов, чувствительных
к АТФ, содержали Р2Х-пуринорецепторы, которые характеризовались
медленной десенситизацией. При аппликациях АТФ одновременно с
АХ во всех исследованных нейронах наблюдалась генерация токов
(IАТФ+АХ),
амплитуда которых не была равна сумме контрольных значений IАТФ
и IAX.
В большинстве случаев амплитуда IАТФ+АХ
не превышала амплитуды большего тока- IАТФ
или IАХ,
то есть наблюдалась взаимная окклюзия IАТФ
и I.АХ.
Данный эффект наблюдался как в присутствии, так и в отсутствие
во внутриклеточном растворе ГТФ (или ГТФ-г-S,
0.2 мМ) и АТФ (2
мМ). Окклюзия наблюдалась и в случае IАТФ
и токов, вызванных аппликациями никотина (150-300 мкМ). В то же
время IАТФ
и быстрые входящие токи, вызванные ионофоретическими аппликациями
5-гидрокситриптамина вследствие активации серотониновых рецепторов,
возможно, 5НТ3-типа, были аддитивными. Не наблюдалось
взаимной окклюзии в случае IАТФ
и медленных АТФ- и АХ-индуцированных К+-токов. Аппликации
через перфузирующий раствор аналогов АТФ: в,г-имидо-АТФ,
б,в-метилен-АТФ
и в,г-метилен-АТФ
в концентрациях 100 мкМ, а также активатора P1-пуринорецепторов
аденозина (100-300 мкМ) не вызывали ионных токов и не оказывали
влияния на IАХ.
Блокатор Р2Y-пуринорецепторов
реактив синий 2 (30 мкМ) не устранял эффекта окклюзии. Блокаторы
НХР триметафан (30 мкМ), гексаметоний (50 мкМ) и d-тубокурарин
(40 мкМ) не оказывали влияния на IАТФ,
но в тоже время полностью блокировали IАХ
как в присутствии, так и в отсутствие АТФ. Представленные результаты
позволяют предположить, что нейроны подслизистого сплетения экспрессируют
два различных подтипа ионотропных Р2Х-пуринорецепторов.
б,в-Метилен-АТФ-нечувствительные
Р2Х-пуринорецепторы с медленной десенситизацией и НХР
не являются функционально независимыми, возможно, в результате
существования прямой связи между этими рецепторами.