РАСПРЕДЕЛЕНИЕ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ФОТОСЕНСА, НОВОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ПРЕПАРАТА, В ЖИВЫХ КЛЕТКАХ ПО ДАННЫМ МЕТОДА КОНФОКАЛЬНОЙ МИКРОСПЕКТРОСКОПИИ
Феофанов А. В., Гришин А. И., Шитова Л. А., Куделина И. А., Кармакова Т. А., Якубовская Р. И., Эгрет-Шарлье М., Вини П.
Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН, 117871 Москва; *Московский научно-исследовательский институт им. П. А. Герцена, 125284 Москва; **Centre de Biophysique Moleculaire, C.N.R.S., 45071 Orleans, France
В данной работе методом
КОМИРСИ изучался фотосенс (Фс) - фотосенсибилизатор второго
поколения на основе смеси ди-, три- и тетрасульфированных производных
фталоцианина алюминия (AlPcS2, AlPcS3, AlPcS4
соответственно). Методом КОМИРСИ на живых клетках аденокарциномы
легкого человека А549 исследовали внутриклеточную локализацию,
фармакокинетику, взаимодействия Фс, а также его компонентов AlPcS2,
AlPcS3, AlPcS4. Изучение клеточной фармакокинетики
Фс показало, что его проникновение в клетки происходит за время
меньше 1 мин. В течение первых 30 мин инкубации внутриклеточная
концентрация Фс быстро увеличивается, выходит на насыщение (10
- 20% от концентрации Фс в среде) и в последующие несколько часов
возрастает очень слабо. Уже через 10 мин инкубации клеток с Фс
формируется характерная картина его относительного распределения.
При этом Фс локализован как в цитоплазме, так и в ядре клетки.
В цитоплазме препарат концентрируется вблизи ядра, по-видимому,
в митохондриях. Выведение препарата из клеток происходит медленно.
В течение 1 ч инкубации клеток в среде без Фс внутриклеточная
концентрация препарата снижается в 2 - 3 раза. Дальнейшее выведение
Фс резко замедляется. Значительная доля Фс удерживается в цитоплазме
и в меньшей степени в ядрах клеток в течение не менее 29 час после
удаления препарата из внешней среды. Спектральный анализ позволил
установить, что компонент AlPcS2 и большая часть AlPcS3
в цитоплазме находятся в свободном состоянии. Часть компонента
AlPcS3 и большая доля AlPcS4 в цитоплазме
связаны с белками и мембранными структурами. В ядре весь Фс связан
с белками. Обнаружено, что уровень накопления в клетке и распределение
в клеточных компартментах зависят от степени сульфирования фталоцианина
алюминия. Так, в ряду AlPcS2, AlPcS3, AlPcS4
снижается способность проникновения в клетку, и возрастает
тенденция проникновения в ядро.