ОСОБЕННОСТИ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ АКТИНОВОГО ЦИТОСКЕЛЕТА И РАСПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИН-СВЯЗЫВАЮЩИХ БЕЛКОВ ПРИ ВЗАИМОДЕЙСТВИИ КЛЕТОК С РАЗНЫМИ ЛИГАНДАМИ
Арэ А. Ф., Кропачева И. В., Воронкина И. В., Черепанова О. А., Пинаев Г. П.
Институт цитологии РАН, 194064 Санкт-Петербург
Методом флуоресцентной
конфокальной лазерной сканирующей микроскопии выявлены особенности
пространственной организации актинового цитоскелета клеток линии
А-431 при их распластывании на субстрате, покрытом разными лигандами
(фибронектином, ламинином, антителами к эпидермальному фактору
роста). Показано, что характер образующихся актиновых структур
определяется типом иммобилизованного лиганда. При распластывании
на фибронектине кортикальная сеть коротких пучков микрофиламентов
и ориентированных в одном направлении стресс-фибрилл сосредоточена
в вентральной области цитоплазмы. При взаимодействии с антителами
актиновые структуры образуют широкий слой циркулярных пучков микрофиламентов,
распространяющихся в апикальную область и являющихся основой,
на которой локализованы фокусы формирования многочисленных филоподиальных
структур. В клетках, распластанных на фибронектине, винкулин сосредоточен
в фокальных контактах, а при распластывании на антителах рассеян
диффузно в цитоплазме без видимого контакта с актиновыми структурами.
Вопреки существующим представлениям о мембранной локализации актина,
он распределяется вдоль пучков микрофиламентов, образуя поперечную
исчерченность. Продемонстрирована динамика перестроек актиновых
структур под действием на клетки, распластанные на фибронектине
и антителах, эпидермального фактора роста. Впервые получена трехмерная
реконструкция актинового цитоскелета клеток линии А-431, распластанных
на фибронектине и на антителах к эпидермальному фактору роста.
Работа поддержана грантом РФФИ № 98-04-49753.