ДЕЙСТВИЕ ГИПЕРТОНИЧЕСКОГО СТРЕССА НА ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ АНИОННОГО КАНАЛА
Лупилова Н. А., Рамазанов В. В., Бондаренко Т. П.
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, 310015 Харьков, Украина
Методом рН-метрии исследовали
влияние растворов с различной ионной силой на транспорт Сl-
и SO42- через мембрану эритроцитов в сульфатной
среде. Объектом исследования являлись эритроциты донорской крови
человека, которые вносили в термостатируемую ячейку с рН-электродом
(гематокрит составлял 2%). Функционирование анионного канала эритроцитов
оценивали по динамике изменения рН суспензии клеток и регистрировали
посредством самописца. При внесении эритроцитов в среду, содержащую
сульфат, происходит изменение рН суспензии клеток, представляющее
собой двухфазную кривую, которая включает в себя фазу закисления
и фазу защелачивания. Существование двух фаз разнонаправленного
сдвига рН говорит о наличии двух видов транспорта анионов. Фаза
закисления отражает выход Сl-,
тогда как фаза защелачивания представляет собой транспорт SO42-
в эритроциты. Транспорт сульфата происходит в обмен на внутриклеточный
хлорид, следовательно, изменение концентрации SO42-
должно приводить к сдвигу количественного соотношения между чистым
выходом анионов Сl-
и его выходом в обмен на внеклеточный SO42-.
Это приводит к изменению степени закисления и защелачивания, что,
очевидно, обусловлено количеством переносимого аниона Сl-
из клетки тем или иным видом транспорта. При этом следует указать,
что чувствительность к гипертоническому воздействию двух способов
выхода Сl-
из клетки различна. Увеличение концентрации сульфата в среде выше
500 мМ приводит к значительным изменениям динамики сдвига рН в
суспензии клеток. При этом отмечается ингибирование как фазы закисления,
так и фазы защелачивания, что, вероятно, связано с модифирирующим
влиянием гипертонического воздействия на структурное состояние
канала. Это предположение подтверждается и результатами, полученными
при использовании фиксированной концентрации Na2SO4
(120 мМ)
и возрастающей концентрации сахарозы. При концентрации сульфата
2,0 М, а сахарозы 1,2 М достигается практически полное блокирование
второй фазы, однако фаза закисления при этом ингибируется лишь
частично.