О НЕЗАВИСИМОЙ ДЕНАТУРАЦИИ АЛЬБУМИНА И ГАММА-ГЛОБУЛИНОВ В СОСТАВЕ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

Хачидзе Д., Монаселидзе Д.
Институт физики Академии наук Грузии, 380077 Тбилиси, Грузия
В данной работе метод дифференциальной сканирующей микрокалориметрии (ДСМ) использован для исследования тепловых свойств плазмы крови здоровых людей. Цель работы - обнаружить, насколько процесс плавления сывороточного альбумина в разбавленных растворах, близких к физиологическим, отражает реальное поведение этих молекул в составе плазмы/сыворотки крови. Тепловой спектр процесса денатурации плазмы/сыворотки крови здоровых людей был получен на ДСМ. Показано, что изменение теплоемкости начинается при 300С и увеличивается линейно с увеличением температуры до области, где происходит интенсивное теплопоглощение, связанное с процессом денатурации теплоемкости, D Сd составляет величину 0,24 Дж/г·К, интегральная теплота плавления - 19,3±0,4Дж/г. Процесс теплопоглощения протекает в широком температурном интервале 40 -95 0С и содержит резкий интенсивный пик с =60,5±0,30С, D=6,5±0,50С с плечами с высокотемпературной стороны с =79,5±1,0 0С, D=8,5±0,50С. Деконволюция этой кривой на простые элементы дает 6 стадий перехода. Предварительный нагрев сыворотки до 63, 68 и 760С и ее охлаждение до 200С с последующим сканированием показал, что: а) пик теплопоглощения при 60,5 0С не восстанавливается, а плечи при 64,5 и 71,00С представлены в виде пиков на кривых теплопоглощения; пик при 79,50С не меняется; б) при нагреве до 680С, на кривых теплопоглощения наблюдаются пики при 71,0 и 79,50С, а при нагреве до 760С - только пик с =79,50С. DНd и DТd пиков при 64,5, 71,5 и 79,50С с большой точностью совпадают с величиной пиков, полученными после деконволюции кривой нативной сыворотки. Эксперименты по тепловой обработке сыворотки показали, что плавление обезжиренных и необезжиренных фракций альбумина и g-глобулинов происходит независимо друг от друга. Расчет для I и II фракций альбумина и g-глобулинов даёт величины 2,8±0,1, 0,9±0,1, 5,7±0,1 соответственно. рассчитывается по формуле . Таким образом, мы можем утверждать, что молекула альбумина в составе сыворотки содержит две субфракции с Td=60,5 и 79,50С. Первая субфракция включает ~ 3 кооперативно плавящихся блоков, вторая - 1 блок, который плавится как единая кооперативная система, и g-глобулины, состоящие по крайней мере из 6 субфракций. Эти величины с хорошей точностью совпадают с количеством субфракций, определённых ранее Х-лучами на HAS кристаллах, и ДСМ исследованием разбавленных HAS растворов и g-глобулинов.