Хачидзе Д., Монаселидзе Д.
В данной работе метод
дифференциальной сканирующей микрокалориметрии (ДСМ) использован
для исследования тепловых свойств плазмы крови здоровых людей.
Цель работы - обнаружить, насколько процесс плавления сывороточного
альбумина в разбавленных растворах, близких к физиологическим,
отражает реальное поведение этих молекул в составе плазмы/сыворотки
крови. Тепловой спектр процесса денатурации плазмы/сыворотки крови
здоровых людей был получен на ДСМ. Показано, что изменение теплоемкости
начинается при 30
0С
и увеличивается линейно с увеличением температуры до области,
где происходит интенсивное теплопоглощение, связанное с процессом
денатурации теплоемкости, D
Сd
составляет
величину 0,24 Дж/г·К, интегральная теплота плавления - 19,3±0,4Дж/г.
Процесс теплопоглощения протекает в широком температурном интервале
40 -95
0С
и содержит резкий интенсивный пик с

=60,5±0,3
0С,
D

=6,5±0,5
0С
с плечами с высокотемпературной стороны с

=79,5±1,0
0С,
D

=8,5±0,5
0С.
Деконволюция этой кривой на простые элементы дает 6 стадий перехода.
Предварительный нагрев сыворотки до 63, 68 и 76
0С
и ее охлаждение до 20
0С
с последующим сканированием показал, что: а) пик теплопоглощения
при 60,5
0С
не восстанавливается, а плечи при 64,5 и 71,0
0С
представлены в виде пиков на кривых теплопоглощения; пик при 79,5
0С
не меняется; б) при нагреве до 68
0С,
на кривых теплопоглощения наблюдаются пики при 71,0 и 79,5
0С,
а при нагреве до 76
0С
- только пик с

=79,5
0С.
D
Нd
и D
Тd
пиков при 64,5, 71,5 и 79,5
0С
с большой точностью совпадают с величиной пиков, полученными после
деконволюции кривой нативной сыворотки. Эксперименты по тепловой
обработке сыворотки показали, что плавление обезжиренных и необезжиренных
фракций альбумина и g-глобулинов происходит независимо друг от
друга. Расчет

для
I
и II фракций
альбумина и g-глобулинов даёт величины 2,8±0,1, 0,9±0,1, 5,7±0,1
соответственно.

рассчитывается по формуле

. Таким образом, мы можем утверждать,
что молекула альбумина в составе сыворотки содержит две субфракции
с
Td=60,5
и 79,5
0С.
Первая субфракция
включает ~
3 кооперативно плавящихся блоков, вторая - 1 блок, который плавится
как единая кооперативная система, и g-глобулины, состоящие по
крайней мере из 6 субфракций. Эти величины с хорошей точностью
совпадают с количеством субфракций, определённых ранее Х-лучами
на HAS кристаллах,
и ДСМ исследованием
разбавленных HAS
растворов и g-глобулинов.