Для подтверждения зависимости функционирования Na⁺-,Ca²⁺-обмена плазматической мембраны секреторных клеток слюнной железы личинки Chironomus plumosus L. от активности Са²⁺-насоса в условиях эксперимента (т.е., внутриклеточной перфузии) исследовали влияние ингибиторов Са²⁺-АТФаз (эозина Y и ортованадата) на амплитуду его тока (I_Na(Ca)). Интегральный ток входящего направления вызывали мгновенной гиперполяризацией мембраны от -20 до -60 мВ с применением метода фиксации потенциала при физиологических внеклеточных [Na⁺] и [Са²⁺], а также без стабилизации внутриклеточной [Са²⁺]. Для гиперполяризации мембраны использовали прямоугольные электрические импульсы продолжительностью 3,5 с и частотой 0,1 Гц. Предыдущими исследованиями уставлено, что добавление к раствору для внутриклеточной перфузии
1 ммоль/л АТФ на фоне предварительного введения глутатиона сопровождается уменьшением амплитуды I_Na(Ca). Этот эффект обусловлен, возможно, снижением внутриклеточной [Ca²⁺] в результате увеличения Са²⁺-АТФазной активности. Наше предположение подтверждается тем, что амплитуда I_Na(Ca) исследованных клеток уменьшается на 12,46±1,57 % (n=5, P < 0,05) вследствие уменьшения с помощью Са-Мg-EGТА-буфера уровня ионизированного Са²⁺ во внутриклеточном растворе на два порядка (от 10^-5 к 10^-7 моль/л). Выяснилось также, что при добавлении к внутриклеточному раствору 10 мкмоль/л эозина Y (растворяли в ДМСО) амплитуда І_Na(Ca) обратимо увеличивалась на 15,44±1,64 % (n=6, Р < 0,001). Аналогично действует и ортованадат в концентрации 10 мкмоль/л, стимулирующий эффект которого, правда, уменьшался при увеличении концентрации до 100 мкмоль/л. Таким образом, изменение функциональной активности Са²⁺-насоса существенно влияет на амплитуду входящего І_Na(Ca) даже в условиях внутриклеточной перфузии, что необходимо учитывать при анализе влияния физиологически активных веществ на функционирование Na⁺-,Ca²⁺- обменника плазматической мембраны клеток.