РЕОЛОГИЧЕСКИЕ И ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА РЯДА МИКРОБНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ
Шмелев В. П., Гулов В. П., Гребенникова Л. В., Косенко Л. В.
Кафедра биофизики и биотехнологии Воронежского госуниверситета, 394693 Воронеж
Среди микробных экзополисахаридов
(ЭПС) препараты ГП-3 и Р-97 вьпгодно выделяются своей доступностью
и технологичностью получения и очистки, экологической чистотой,
иммуномодулирующим эффектом. Они являются продуцентами Bacillus
mucilaginosus и Rhizobium legiminosarum. Изучаемые
полисахариды - внеклеточные продукты бактерий с высокой вязкостью
растворов, низкой водоотдачей, способны изменять текучесть, вязкость
и другие реодинамические характеристики растворов, эмульсий, дисперсий,
молекулярной массой около 85 и 63 кДа. Для выделения и очистки
полисахаридов применяли осаждение этанолом, противоточный диализ,
разделение на сефадексе, лиофильную сушку, аналитическое центрифугирование.
При помощи модифицированного фотоколориметрического метода определяли
скорость оседания эритроцитов (СОЭ), снимая показания светопропускания
каждые 5 мин, что позволяло изучать динамику оседания. Изучили
концентрационную зависимость влияния полисахаридов 10-9,
l0-8, 10-6 и 10-5 моль/л в изотоническом
растворе сахарозы (10%) на СОЭ. Исследовали кинетику осмотического
гемолиза эритроцитов в 0,4% растворе NaCI в присутствии полисахаридов
разной концентрации от 10-9 до 10-5 моль/л.
Относительную вязкость растворов определяли при помощи капиллярного
вискозиметра Оствальда. Малые концентрации ЭПС (10-5
моль/л) как полисахарида Р-97, так и ГП-3 заметно увеличивали
СОЭ и повышали степень (полноту) оседания эритроцитов по сравнению
с 5% раствором глюкозы или 10% раствором сахарозы. При концентрациях
полисахаридов ГП-3 и Р-97 10-7, 10-6 и
10-5 моль/л достоверных отличий СОЭ от контрольной
серии не обнаружено. Регистрация эритрограмм при помощи фотоколориметра
КФК-2МП в 0,4% растворе NaCI позволяет говорить о наличии защитного
эффекта только при высоких концентрациях 10-6 и 10-5
моль/л как для препарата ГП-3, так и для Р-97. Синтетический
полимер ПАА оказался токсичнее ПГ-3 в 79, а Р-97 в 149 раз. Экстраполированная
полулетальная доза для человека (ЛД50) при внутрибрюшинном введении
должна составлять для полисахарида ГП-3 - 734 мг/кг, Р-97 -
1364 мг/кг и ПАА - 9 мг/кг. Природные ЭПС были отнесены к
малотоксичным, а ПАА - ко второму классу опасности по ГОСТ
12.1.007-76. Повышение осмотической резистентности эритроцитов
могло быть результатом встраивания в мембрану молекул полисахаридов
при высокой их концентрации (10-6, 10-5
моль/л).