ЯМР-ИЗУЧЕНИЕ ВОДОПРОНИЦАЕМОСТИ ДВУХ ТРАНСПОРТНЫХ КАНАЛОВ В ПЛАЗМОДЕСМАХ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК

Великанов Г. А., Волобуева О. В., Хохлова Л. П.
Казанский институт биохимии и биофизики КНЦ РАН, 420503, Казань
На локальном участке плазмалеммы изолированных из клеток стеблей проростков гороха протопластов, предварительно стабилизированных в высококалиевой среде (130 мМ), с использованием техники макроскопической ПЭТЧ-регистрации (ПР-1) при неплотном контакте стеклянной микропипетки с поверхностью мембраны, фиксировали скачок высокого гиперполяризующего напряжения. После некоторого порогового значения этого напряжения (?380 mV) в условиях механического натяжения подпипеточного фрагмента плазмалеммы обнаружено возникновение макроскопического ионного тока входящего направления с быстрой кинетикой нарастания (?1 мсек) и спада (?4 мсек). Применением второй системы ПЭТЧ-регистрации (ПР-2) и, соответственно, второй регистрирующей микропипетки на одном и том же протопласте установлено, что начальная компонента тока, регистрируемого системой ПР-2, находится в противофазе и полностью подобна начальной компоненте тока (кривой активации), регистрируемого системой ПР-1, а отношение максимальных значений этих токов сравнимо с отношением площади додпипеточного фрагмента к площади всей наружной мембраны протопласта. Это означает, что первая компонента регистрируемого системой ПР-1 макроскопического тока связана с резким переходом подпипеточиого фрагмента плазмалеммы в состояние высокой проводимости под влиянием надпорогового электрического напряжения (плотность тока ?10 мкА/см2). Опыты с ингибитором кальмодулина - хлорпромазином (ХП) были проведены в двух вариантах: 1) добавление ХП в наружный раствор с подключенной к протопласту регистрирующей микропипеткой (эндогенное влияние на подпипеточный фрагмент плазмалеммы), 2) введение ХП в микропипетку (экзогенное влияние на подпипеточный фрагмент). Под влиянием ХП (10-5 М), вводимого "эндогенно" через 20 минут макроскопический токовый ответ на скачок надпорогового напряжения блокируется, в то время как экзогенно вводимый ХП существенно понижает пороговое напряжение, увеличивает амплитуду и характер токового ответа подпипеточного фрагмента плазмалеммы. Можно предполагать, что резкое увеличение проводимости подпипеточного фрагмента плазмалеммы под влиянием скачка надпорогового напряжения связано с обратимым электрическим пробоем аквапоринов, находящихся в условиях механического натяжения мембраны, или с электрическим пробоем активируемых натяжением ионных каналов плазмалеммы.